DOI: 10.11958/20222091
CHD4调控端粒功能促进宫颈癌HeLa细胞生长的机制研究
王倩倩
李婷芳
王峰
天津医科大学基础医学院,300070
摘要：目的 探讨染色质域解旋酶DNA结合蛋白4(CHD4)通过调控端粒功能对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移的影响.方法 慢病毒感染构建CHD4稳定敲低的宫颈癌HeLa细胞系,实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot分别检测CHD4的mRNA和蛋白表达水平;将宫颈癌HeLa细胞分为对照组、shCDH4-1组、shCHD4-2组,CCK-8实验检测CHD4对HeLa细胞增殖能力的影响;集落形成实验检测细胞的集落数量;划痕愈合实验检测细胞迁移能力;裸鼠荷瘤实验观察移植瘤生长情况;免疫荧光-荧光原位杂交技术检测CHD4与HeLa细胞中端粒的共定位及各组细胞中端粒的损伤情况,端粒损伤以损伤因子γH2AX与端粒的共定位表示;中期染色体-荧光原位杂交技术检测各组细胞中端粒功能的变化,端粒信号缺失(SFE)或多端粒信号(MTS)的染色体比例升高代表端粒功能障碍.结果 慢病毒感染成功构建CHD4稳定下调的HeLa细胞系(P＜0.05).与对照组相比,shCDH4-1组和shCHD4-2组的细胞增殖能力、集落形成能力、迁移能力、体内肿瘤生长能力均明显下降(P＜0.05).免疫荧光-荧光原位杂交实验表明,CHD4定位于HeLa细胞的端粒上.与对照组相比,CHD4的缺失不足以引起端粒的DNA损伤(P＞0.05),但会导致HeLa细胞SFE的染色体比例明显增多(P＜0.05).结论 CHD4可通过调控HeLa细胞的端粒功能,促进宫颈癌细胞的增殖和迁移.
关键词：HeLa细胞端粒宫颈肿瘤细胞增殖染色质域解旋酶DNA结合蛋白4
分类号：R737.33(泌尿生殖器肿瘤)
资助基金：国家自然科学基金(32170762)
论文发表日期：2023-09-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 909-915 )
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