蔓荆子黄素调控miR-378/PRRX1轴对胃癌生物学行为的影响

张丛; 冯华; 黄小龙; 王旋

doi:10.11958/20222053

摘要：目的探究蔓荆子黄素(Cas)对胃癌(GC)SGC-7901细胞增殖、侵袭、迁移及微小RNA-378(miR-378)/配对相关同源框1(PRRX1)轴的影响.方法不同浓度Cas(0、5、10、20、40、80 μmol/L)处理SGC-7901细胞48 h.将对数生长期的SGC-7901细胞分为:对照组、Cas低浓度组(10 μmol/L)、Cas中浓度组(20 μmol/L)、Cas高浓度组(40 μmol/L)、Cas高浓度+miR-378小干扰RNA(siRNA)组(40 μmol/L Cas+miR-378 siRNA)、Cas高浓度+PRRX1组(40 μmol/L Cas+PRRX1 过表达质粒)、Cas高浓度+miR-378 siRNA+PRRX1 组(40 μmol/L Cas+miR-378 siRNA+ PRRX1过表达质粒).MTT法、集落形成实验、流式细胞术、Transwell小室、划痕实验分别测定各组SGC-7901细胞活力、集落形成数量、凋亡率、侵袭及迁移能力;qPCR、蛋白印迹实验分别检测SGC-7901细胞miR-378、PRRX1蛋白表达水平;双萤光素酶实验验证miR-378和PRRX1靶向关系;体内异种移植SGC-7901细胞建立裸鼠移植瘤模型,验证Cas的抗癌活性及对miR-378表达的影响.结果 Cas 10、20、40、80 μmol/L组SGC-7901细胞活力呈浓度依赖性降低(P＜0.05),选取10、20、40 μmol/L的Cas作为后续研究浓度.与对照组相比,Cas低、中、高浓度组SGC-7901细胞活力、集落形成数量、侵袭细胞数量、划痕愈合率、PRRX1蛋白表达水平依次降低(P＜0.05),细胞凋亡率和miR-378表达水平依次升高(P＜0.05);与Cas高浓度组相比,Cas高浓度+miR-378 siRNA组和Cas高浓度+PRRX1组SGC-7901细胞活力、集落形成数量、侵袭细胞数量、划痕愈合率、PRRX1蛋白表达水平升高,细胞凋亡率降低(P＜0.05),Cas高浓度+miR-378 siRNA组SGC-7901细胞miR-378表达水平降低(P＜0.05);与Cas高浓度+miR-378 siRNA组相比,Cas高浓度+PRRX1组SGC-7901细胞miR-378表达水平升高(P＜0.05);与Cas高浓度+miR-378 siRNA组、Cas高浓度+PRRX1组相比,Cas高浓度+miR-378 siRNA+PRRX1组SGC-7901细胞活力、集落形成数量、侵袭细胞数量、划痕愈合率、PRRX1蛋白表达水平升高(P＜0.05),细胞凋亡率降低(P＜0.05).在SGC-7901细胞中,miR-378可靶向调控PRRX1表达;Cas可抑制体内裸鼠移植瘤生长并促进miR-378表达(P＜0.05).结论 Cas可能通过调控miR-378/PRRX1轴抑制SGC-7901细胞增殖、侵袭和迁移.