DOI: 10.11958/20230521
沉默Sp5对mEPMCs中Wnt信号通路相关因子及增殖能力的影响
柏宇1
兰雪娇1
唐璟1
文雨1
吕明敏1
宋庆高2
1.遵义医科大学口腔医学院(邮编 563000)2.遵义医科大学附属口腔医院口腔颌面外科
摘要：目的 探讨沉默转录因子特异蛋白5(Sp5)对小鼠胚胎腭突间充质细胞(mEPMCs)中Wnt信号通路相关因子及增殖能力的影响.方法 体外分离并培养孕14.5 d C57BL/6J小鼠的mEPMCs,细胞免疫荧光染色鉴定细胞来源;利用慢病毒转染技术沉默mEPMCs中Sp5基因的表达,Western blot验证转染效率.后续实验设空白对照组、空载病毒组、沉默组(Sp5-shRNA组).各组细胞转染72h后,采用Western blot及RT-qPCR法分别检测β-连环蛋白(β-catenin)、丝氨酸/苏氨酸激酶(GSK-3β)、Wnt家族成员3a(Wnt3a)、特异性周期蛋白D1(CyclinD1)蛋白及mRNA的表达;CCK-8法检测细胞增殖能力;免疫荧光法检测5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)阳性细胞增殖率;流式细胞术检测细胞周期.结果 成功分离mEPMCs并沉默Sp5的表达.Western blot及RT-qPCR结果显示,Sp5-shRNA组β-catenin、GSK-3β、Wnt3a、CyclinD1蛋白及mRNA表达水平均高于空白对照组和空载病毒组(P＜0.05);Sp5-shRNA组细胞增殖能力和EdU阳性细胞增殖率均高于空白对照组和空载病毒组(P＜0.05);Sp5-shRNA组mEPMCs处于S期的细胞比例高于空白对照组和空载病毒组(P＜0.05).结论 沉默mEPMCs中Sp5可通过对Wnt信号通路的调控来参与腭的发育,促进mEPMCs的增殖.
关键词：Sp转录因子类Wnt信号通路细胞增殖腭突间充质细胞Sp5基因
分类号：R782.22(口腔颌面部外科学)
资助基金：国家自然科学基金(8186040248)
论文发表日期：2023-12-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 1314-1321 )
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