DOI: 10.11958/20231741
ADAM8的表达对急性酒精性肝损伤小鼠的影响
杨孟利
李三强
张凯杰
崔钦奕
冯家阳
李依林
李昊远
齐婧含
河南科技大学基础医学与法医学院(邮编 471000)
摘要：目的 探究CRISPR/Cas9技术靶向抑制去整合素-金属蛋白酶8(ADAM8)在小鼠急性酒精性肝损伤中的作用及分子机制.方法 18只6～8周龄健康雌性昆明小鼠根据随机数字表法分为正常组、酒精组和质粒组,每组6只.正常组不做处理,质粒组采用水流动力学注射法尾静脉注射利用CRISPR/Cas9技术抑制ADAM8基因的三合一重组质粒ADAM8-sgRNA3(3 g/kg),酒精组尾静脉注射等量生理盐水.酒精组和质粒组采用50%(V/V)分析纯乙醇一次性灌胃(14 mL/kg)诱导急性肝损伤.禁食16 h后进行眼球取血,检测丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)活性;苏木素-伊红(HE)和过碘酸-雪夫(PAS)染色检测肝脏损伤和糖原变化情况;蛋白免疫印迹法检测肝组织中ADAM8、细胞色素CYP450 2E1(CYP2E1)、热休克蛋白70(HSP70)及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路相关因子的表达.结果 与正常组相比,酒精组ALT和AST升高,肝损伤评分增加,糖原含量减少,ADAM8、CYP2E1、磷酸化的细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)、磷酸化的p38(p-p38)MAPK以及磷酸化的c-Jun氨基未端激酶(p-c-Jun)的表达升高,而HSP70的表达降低(P＜0.05).与酒精组相比,质粒组ALT和AST降低,肝损伤评分降低(P＜0.05),糖原含量增多;ADAM8、CYP2E1、p-ERK1/2、p-p38 MAPK以及p-c-Jun的表达降低,HSP70的表达增加(P＜0.05).结论 利用CRISPR/Cas9技术靶向抑制ADAM8的表达,可以通过MAPK信号通路改善小鼠急性酒精性肝损伤.
关键词：ADAM蛋白质类急性酒精性肝损伤丝裂原激活蛋白激酶类CRISPR/Cas9
分类号：R364.5(病理学)
资助基金：国家自然科学基金(82170606)河南省高等学校重点科研项目(23ZX006)
论文发表日期：2024-04-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 346-350 )
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