DOI: 10.11958/20240031
锌指蛋白281抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞上皮间质转化和细胞外基质合成
侯维玲1
乔云阳2
吴小芸2
施会敏2
曲高婷2
张爱青3
1.南京医科大学附属江宁医院儿科(邮编 211100)2.南京医科大学第二附属医院儿科3.南京医科大学第四附属医院儿科
摘要：目的 探讨锌指蛋白281(ZNF281)在高糖(HG)诱导的肾小管上皮细胞(RTECs)上皮间质转化(EMT)和细胞外基质(ECM)合成中的作用及机制.方法 使用HG诱导RTECs以构建糖尿病肾病模型,分为Control组、HG组和Mannitol组,使用CCK-8检测细胞增殖活力.使用小干扰RNA(siRNA)在HG诱导的RTECs中敲低ZNF281的表达水平,分为Control组、HG组、HG+ZNF281 siRNA组和HG+ZNF281 vector组.使用腺苷单磷酸活化蛋白激酶(AMPK)激动剂阿卡地新(AICAR)活化AMPK,分为Control组、HG组、HG+AICAR组和HG+二甲基亚砜组.实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测ZNF281、EMT和ECM合成相关指标表达水平.结果 与Control组相比,HG组ZNF281、波形蛋白(vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)和Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)的蛋白和mRNA表达水平升高,E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平降低;与HG组相比,HG+ZNF281 siRNA组和HG+AICAR组的EMT和ECM合成相关指标的蛋白和mRNA表达水平发生明显变化,同时HG+AICAR组ZNF281的蛋白和mRNA表达水平较HG组降低;在使用AICAR和转染ZNF281过表达质粒共处理的细胞中,AICAR+ZNF281组vimentin、α-SMA、FN、ColⅠ的表达水平较空载组升高,E-cadherin表达水平降低.结论 AMPK通过负向调控ZNF281的表达水平进而抑制HG诱导的RTECs中EMT和ECM合成.
关键词：糖尿病肾病Tristetraprolin蛋白上皮-间质转化细胞外基质AMP活化蛋白激酶类肾小管间质纤维化锌指蛋白281
分类号：R587.24(内分泌腺疾病及代谢病)R34(基础医学)
资助基金：江苏省医学会儿科医学科研专项基金项目(SYH-32034-0073)南京市卫生科技发展专项资金项目(YKK23209)
论文发表日期：2024-07-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 720-726 )
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