DOI: 10.11958/20240738
金合欢素调节HMGB1/TLR4信号通路对脂多糖诱导牙髓细胞凋亡的影响
林瑶1
刘从娜2
王世霞2
张志勇2
1.唐山市妇幼保健院口腔科(邮编 063000)2.河北医科大学第二医院口腔内科
摘要：目的 探究金合欢素(ACE)通过调节高迁移率族蛋白1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)信号通路对脂多糖(LPS)诱导牙髓细胞凋亡的影响.方法 从5例正畸、阻生患者拔除的健康牙齿的牙髓中分离、克隆、纯化第三代牙髓细胞,观察细胞形态并通过免疫荧光鉴定基质细胞表面抗原1(STRO1);流式细胞术鉴定表皮抗原CD90、CD105、CD34、CD45;MTT鉴定ACE对原代牙髓细胞(DPSCs)活性影响.将DPSCs分为Control组(0 μmol/L ACE培养)、LPS组(1 ng/L LPS处理)、L-ACE组(LPS组基础上加20 μmol/L ACE)、H-ACE组(LPS组基础上加40 μmol/L ACE)、pcDNA-NC组(H-ACE组基础上转染pcDNA-NC质粒),HMGB组(H-ACE组基础上转染pcDNA-HMGB).CCK-8检测细胞增殖;克隆形成实验检测克隆形成数;Western blot实验检测HMGB1/TLR4通路、凋亡、炎症相关蛋白的表达;酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中白细胞介素(IL)-1β、IL-4、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量.结果 从细胞形态、STRO1阳性表达以及CD90、CD105呈阳性,CD34、CD45呈阴性鉴定成功分离DPSCs.与Control组比较,LPS组细胞增殖活力、克隆细胞数、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、IL-4水平减少,细胞凋亡率、通路相关蛋白HMGB1、TLR4,凋亡相关蛋白胱天蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-7、Bcl-2相关X蛋白(Bax)以及炎症因子IL-1β、TNF-α水平升高(P＜0.05);与LPS组比较,L-ACE组、H-ACE组细胞增殖活力、Bcl-2、IL-4依次升高,细胞凋亡率、HMGB1、TLR4、Caspase-3、Caspase-7、Bax以及IL-1β、TNF-α水平依次降低(P＜0.05);过表达HMGB逆转了H-ACE对细胞增殖、凋亡、相关蛋白及炎症因子表达的影响(P＜0.05).结论 ACE通过影响HMGB1/TLR4信号通路活化,实现抑制LPS诱导的DPSCs凋亡和炎症反应的作用.
关键词：HMGB1蛋白质Toll样受体4金合欢属脂多糖类牙髓炎细胞凋亡细胞增殖牙髓细胞
分类号：R781.31(口腔内科学)R34(基础医学)
资助基金：河北省医学科学研究重点课题计划项目(20231762)
论文发表日期：2024-12-15
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1238-1243 )
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