金丝桃素通过调控NLRP3炎症小体改善小鼠急性胰腺炎的机制探讨

陈慧; 赵凯; 刘振国; 常瑛; 巨康璐

doi:10.11958/20251147

摘要：目的探究金丝桃素(HY)对小鼠急性胰腺炎(AP)的治疗作用,并揭示其对NOD样受体家族蛋白3(NLRP3)炎症小体信号通路的影响.方法以雨蛙素(CER)建立小鼠AP模型,通过随机抽样的方式分为正常对照组、模型组、HY低剂量(CER+HY 5 mg/kg)组、HY中剂量(CER+HY 10 mg/kg)组、HY高剂量(CER+HY 20 mg/kg)组,每组10只.小鼠266-6胰腺腺泡癌细胞利用胆囊收缩素(CCK)处理并分为Control组、AP组、CCK+HY 1 µmol/L组、CCK+HY 2 µmol/L组、CCK+HY 4 µmol/L组.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠血清淀粉酶(AMS)、脂肪酶、胰蛋白酶和髓过氧化物酶(MPO)的活性,检测炎性因子白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;Western blot检测NLRP3表达;实时定量PCR(qPCR)检测各组小鼠胰腺组织中NLRP3、胱天蛋白酶(Caspase)-1、IL-1β、TNF-α及IL-18 mRNA水平;CCK8法检测各组细胞存活率;qPCR检测各组细胞中NLRP3、Caspase-1和IL-18 mRNA表达水平.结果与正常对照组相比,模型组小鼠血清中AMS、脂肪酶、胰蛋白酶、MPO、IL-1β和TNF-α水平升高,胰腺组织中NLRP3 mRNA及蛋白表达水平,IL-1β和TNF-α、IL-18和Caspase-1 mRNA水平升高(P＜0.01);与模型组相比,HY低、中、高剂量组血清AMS、IL-1β和TNF-α的水平,胰蛋白酶活性,胰腺组织中IL-1β、TNF-α、IL-18、Caspase-1 mRNA水平均降低,HY中剂量组和HY高剂量组血清脂肪酶、MPO水平,胰腺组织NLRP3 mRNA及蛋白表达降低(P＜0.05).与AP组比较,CCK+HY 1 µmol/L组、CCK+HY 2 µmol/L组、CCK+HY 4 µmol/L组细胞存活率均升高,NLRP3、IL-18和Caspase-1 mRNA水平降低,并呈剂量依赖性(P＜0.05).结论金丝桃素在体内外均能有效治疗急性胰腺炎,其发挥治疗作用可能与调控NLRP3炎症小体信号通路有关.