圣草酚调控UBA52表达对代谢相关脂肪性肝病的体内和体外作用

林义伟; 魏谭军; 陈飞; 肖成; 袁烈; 王毅

doi:10.11958/20252251

摘要：目的基于体内和体外水平探究圣草酚(ERI)调控泛素核糖体融合蛋白52(UBA52)表达对代谢相关脂肪性肝病发展的影响.方法采用高脂饮食诱导建立小鼠代谢相关脂肪性肝病模型.将小鼠随机分为正常对照组(Normal组)、模型组(Model组)、低剂量ERI组(ERI-L组,50 mg/kg ERI)、高剂量ERI组(ERI-H组,100 mg/kg ERI),每组12只.油红O染色观察小鼠肝脏组织的脂质沉积;HE染色观察小鼠肝脏组织病理学变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平;免疫印迹法检测肝脏组织中UBA52蛋白表达.采用0.5 mmol/L油酸处理HepG2细胞,诱导体外代谢相关脂肪性肝病模型.将HepG2细胞随机分为对照组(Control组)、油酸诱导组、低浓度ERI组(50 μmol/L ERI)、高浓度ERI组(100 μmol/L ERI)、高浓度ERI+si-NC组(100 μmol/L ERI+转染si-NC)和高浓度ERI+si-UBA52组(100 μmol/L ERI+转染si-UBA52).油红O染色检测各组HepG2细胞的脂质沉积;ELISA检测各组HepG2细胞中TG、TC和氧化应激相关因子超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;免疫印迹法检测HepG2细胞中UBA52、p62、LC3Ⅱ、LC3Ⅰ自噬相关蛋白表达.结果与Normal组相比,Model组血清ALT、AST、LDL-C、TC和TG水平及肝脏组织UBA52蛋白表达升高(P＜0.05),肝脏脂质沉积增多,病理损伤严重,脂质沉积面积占比及非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)活动度评分升高(P＜0.05);ERI-L组、ERI-H组小鼠相应指标变化低于Model组(P＜0.05),且ERI-H组更低(P＜0.05),肝脏脂质沉积减少,病理损伤减轻.与Control组相比,油酸诱导组HepG2细胞TG、TC、MDA水平、脂滴面积占比及UBA52蛋白表达升高,SOD水平、p62、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ降低(P＜0.05);低浓度ERI组、高浓度ERI组对代谢相关脂肪性肝病有治疗作用(P＜0.05),且敲低UBA52表达后加强了ERI对代谢相关脂肪性肝病的治疗作用.结论 ERI可能通过下调UBA52的表达在体内体外水平减缓代谢相关脂肪性肝病的进展.