炙甘草汤调控miR-26b-5p/SMAD4通路对心房颤动大鼠模型心房重构的影响

刘魁智; 宣学习; 周芃; 袁孝伟; 朱自强

doi:10.11958/20252534

摘要：目的探讨炙甘草汤对心房颤动(AF)大鼠模型心房重构及微小RNA(miR)-26b-5p/母亲DPP同源物(SMAD)4通路的影响.方法构建AF大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为AF组、维拉帕米组、炙甘草汤低剂量(炙甘草汤-L)组、炙甘草汤高剂量(炙甘草汤-H)组、炙甘草汤-H+anti-NC组、炙甘草汤-H+miR-26b-5p抑制剂(anti-miR-26b-5p)组,每组18只;另取18只健康大鼠作为对照组.检测各组大鼠心功能、体外AF诱发率;苏木精-伊红(HE)染色及Masson染色观察心房组织病理变化;原位末端标记(TUNEL)染色检测心房组织心肌细胞凋亡情况;免疫组化检测心房组织Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;qRT-PCR检测miR-26b-5p相对表达水平;Western blot检测SMAD4、BCL-2相关X蛋白(BAX)、活化的胱天蛋白酶-3(C-caspase3)的表达;双萤光素酶实验验证miR-26b-5p与SMAD4的靶向关系.结果与对照组相比,AF组心房组织出现严重病理损伤,心肌细胞结构异常、肿胀稀疏排列紊乱、蓝色胶原沉积明显;左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)升高,左室射血分数(LVEF)、左室缩短分数(LVFS)降低;AF诱发率、胶原面积百分数、细胞凋亡率增加;BAX、C-caspase3、ColⅠ、α-SMA、SMAD4蛋白表达水平升高,miR-26b-5p水平降低(P＜0.05).与AF组相比,维拉帕米组、炙甘草汤-L组、炙甘草汤-H组治疗可逆转上述指标的变化趋势,减轻心房组织病理损伤,减少蓝色胶原沉积.炙甘草汤-H+anti-miR-26b-5p组可逆转炙甘草汤-H对AF大鼠模型心房重构的改善作用.Starbase网站及双萤光素酶基因报告结果显示,miR-26b-5p与SMAD4之间存在靶向关系.结论炙甘草汤可能通过上调miR-26b-5p进而抑制SMAD4表达,改善AF大鼠心房重构.