克隆IN-1重组单链抗体基因与促进中枢神经再生的研究
公茂青1
周力2
王勇1
刘可瑜3
王运杰1
1.中国医科大学附属第一医院神经外科,辽宁省沈阳市,1100012.东丰县医院神经外科,吉林省东丰县,1363003.营口市中心医院神经外科,辽宁省营口市,115002
摘要：目的利用基因工程技术,对 IgMG型的 IN-1的基因进行改良,以得到 IN-1重组单链抗体( scFv) cDNA基因片段为促使受损的中枢神经再生和治疗弥漫性轴索损伤开辟一个崭新途径.方法宿主菌为大肠杆菌 DH5a,克隆质粒为 pUC18.参照 genebank中发表的 IN-1抗体的轻链重链序列,重新设计适于在大肠杆菌中表达的目的基因片段,将该基因双链分成 35个小片段合成,经退火、复性连接成目的片段后,克隆到经过 BamHI和 HindIII双酶切的克隆载体 pUC18中,并转化大肠杆菌 DH5a,抽提重组子 pUC18/744进行克隆 PCR、酶切鉴定及测序分析.结果测序结果证明获得的基因序列与实验设计仅差一个碱基.结论正确设计并合成了 IN-1重组单链抗体( IN-1-scFv)的 cDNA,为深入研究其生物活性奠定了基础,也为应用抗体工程治疗弥漫性轴索损伤开创了一个新思路.
关键词：遗传载体基因合成
分类号：R741(神经病学)
资助基金：国家自然科学基金(39970753)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：2( 1904-1905 )
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