大鼠心肌成纤维细胞组织金属蛋白酶抑制剂mRNA水平检测
杨学东1
赵连友1
王士雯2
李立文3
田建伟1
苏明权4
1.解放军第四军医大学唐都医院心脏内科,陕西省西安市,7100382.解放军总医院老年心血管病研究所,北京,1008533.解放军第四军医大学全军骨科研究所,陕西省西安市,7103234.解放军第四军医大学西京医院临床分子生物学研究中心,陕西省西安市,710032
摘要：目的通过建立多重反转录聚合酶链反应( RT-PCR)方法,旨在测定大鼠心肌成纤维细胞组织金属蛋白酶抑制剂-1( TIMP-1)、组织金属蛋白酶抑制剂-2( TIMP-2)的 mRNA水平.方法采用胶原酶-胰蛋白酶消化法培养成年雌性 SD大鼠的心肌成纤维细胞,提取细胞总 RNA并进行反转录反应.自行设计大鼠 TIMP-1,TIMP-2和内参照 GAPDH的 PCR引物序列,进行多重 PCR反应, PCR产物经 20 g/L琼脂糖凝胶电泳分析目的基因片段.结果 20 g/L琼脂糖凝胶电泳在同一条泳道显示 TIMP-1,TIMP-2和 GAPDH 3条目的 DNA条带,表明成功地同时扩增了 TIMP-1,TIMP-2和 GAPDH基因.结论采用多重 RT-PCR方法,测定了大鼠心肌成纤维细胞 TIMP-1,TIMP-2 mRNA水平,此方法为研究高血压病心肌纤维化提供了可靠手段.
关键词：成纤维细胞大鼠组织金属蛋白酶抑制剂逆转录聚合酶链反应
分类号：R54(心脏、血管（循环系）疾病)
资助基金：国家重点基础研究发展计划（973计划）(G200057004)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：2( 2154-2155 )
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