多重PCR在瘢痕疙瘩Fas基因突变分析中的应用
靳睿
高建华
刘晓军
1.解放军第一军医大学南方医院整形外科,广东省广州市,5105152.解放军第一军医大学南方医院整形外科,广东省广州市,5105153.解放军第一军医大学南方医院整形外科,广东省广州市,510515
摘要：目的:建立瘢痕疙瘩 Fas基因常见突变外显子的多重 PCR扩增反应体系,以利进行批量瘢痕疙瘩基因突变的筛选和检测. 方法:取正常皮肤、增生瘢痕和瘢痕疙瘩组织 DNA样本,根据瘢痕疙瘩 Fas基因易发突变的外显子 6, 8, 9之序列,按照多重 PCR引物设计原则,建立 3对相应引物,先分别找出各外显子的最佳扩增条件,再进行综合分析,最终找到一个理想的多重 PCR扩增条件. 结果:各外显子单一扩增片段和多重 PCR扩增条带均清晰,产量较高,无非特异性扩增,产物长度与理论值一致; DNA测序证实,各扩增产物即各外显子基因片段. 结论:成功建立了瘢痕疙瘩 Fas基因常发突变外显子的多重 PCR扩增体系,与以往单基因分次扩增相比,实现了一次同时扩增 3个基因片段,为瘢痕疙瘩基因诊断和进一步相关的分子生物学研究提供了一个经济、快捷的方法,对于瘢痕疙瘩 Fas基因的突变研究具有较高的应用价值.
关键词：瘢痕疙瘩聚合酶链反应基因表达
分类号：R619(外科手术学)
资助基金：国家自然科学基金(39870807)
论文发表日期：2003-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 3190-3191 )
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