骨形态发生蛋白诱导基因克隆和表达的实验研究
李丹1
胡蕴玉1
张彩莲2
李立文1
1.解放军第四军医大学西京医院骨科研究所,陕西省西安市,7100322.延安大学医学院附属医院呼吸内科,陕西省延安市,716000
摘要：目的:用基因工程技术在大肠杆菌中表达骨形态发生蛋白诱导基因(BMP-2-induced gene 3 kb gene, BIG-3)所编码的蛋白.方法:依据 Genbank中 BIG-3的基因序列设计并合成引物,从新生小鼠颅骨组织中提取总 RNA,通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)得到 BIG-3全长编码序列.将所得到的基因片段克隆至原核表达载体 pGEX-4T-2的多克隆位点获得 pGEX-4T-2-BIG-3重组表达载体,经测序证实后转化大肠杆菌 BL21(DE3)菌株,挑选阳性克隆,经诱导表达后 SDS-PAGE鉴定.结果:克隆得到 BIG-3全长编码序列并在大肠杆菌中表达了 GST-BIG-3融合蛋白,融合蛋白约占菌体总蛋白的 45.3%.结论:通过 RT-PCR从新生小鼠颅骨中克隆到 BIG-3基因并在大肠杆菌中获得 GST-BIG-3融合蛋白的高水平诱导表达.
关键词：骨形态发生蛋白质类基因遗传学技术
分类号：R318(医用一般科学)
论文发表日期：2004-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1446-1447 )
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