传代培养密度对人间充质干细胞增殖及成骨分化的影响
段小军
杨柳
陈光兴
李忠
张洪鑫
1.解放军第三军医大学西南医院关节外科中心,重庆市,4000382.解放军第三军医大学西南医院关节外科中心,重庆市,4000383.解放军第三军医大学西南医院关节外科中心,重庆市,4000384.解放军第三军医大学西南医院关节外科中心,重庆市,4000385.解放军第三军医大学西南医院关节外科中心,重庆市,400038
摘要:背景:组织工程技术的快速发展为骨缺损完全再生修复带来了新的希望,种子细胞的快速扩增是其中的关键问题之一.目的:观察人间充质干细胞传代培养时,细胞种植密度对间充质干细胞增殖及成骨诱导分化影响.设计:重复测量设计.单位:解放军第三军医大学细胞培养室和检测分析室.对象:实验于2003-01/2004-03在解放军第三军医大学的创伤、烧伤和复合伤国家重点实验室完成.从5例男性健康志愿者髂骨骨髓中分离扩增的干细胞.方法:将第2代间充质干细胞以8×103/cm2,3×103/cm2,8×102/cm2密度接种,分析其生长曲线,并扩增培养18 d,记录细胞扩增数量,再分析扩增后细胞的生长曲线和成骨诱导能力.主要观察指标:①不同种植密度下细胞生长曲线.②碱性磷酸酶染色和骨钙素的免疫组化染色结果.结果:人骨髓间充质干细胞阴性表达碱性磷酸酶、CD34;在8×103/cm2种植密度下,细胞倍增时间40 h,18 d后细胞数量扩增(51±13)倍;在3×103/cm2种植密度下,细胞扩增(28:±6)倍;在8×102/cm2种植密度下,细胞总数仅增加(5±3)倍.在低密度下获得的细胞增殖能力强于高密度组,两组细胞均具有成骨诱导能力. 结论:种植密度对间充质干细胞增殖有明显影响,快速扩增间充质干细胞作为骨组织工程种子细胞,宜选择8×103/cm2种植密度.
关键词:干细胞骨髓细胞组织工程细胞培养
分类号:R394.2(医学遗传学)
资助基金:中国科学院项目(非规范项目)(30270375)中国科学院项目(非规范项目)(30300079)
论文发表日期:2005-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 132-134 )
英文信息
