CD34+细胞移植后脊髓全横断大鼠脊髓功能恢复的形态学及行为学观察
程昊钰1
何明生1
王廷华2
张洪钿2
王方方1
刘鲲1
黄桂琴2
胡艳丽2
1.云南省肿瘤医院、昆明医学院第三附属医院血液科,云南省昆明市,6501182.昆明医学院神经科学研究所,云南省昆明市,650031
摘要：目的:观察脊髓全横断SD大鼠模型骨髓CD34+细胞移植术后,脊髓功能恢复情况.方法:实验于2004-11/2005-07在昆明医学院神经科学研究所完成.①采用Percoll细胞分离液离心+贴壁分离法对绿色荧光蛋白转基因小鼠骨髓细胞进行粗筛后,收集骨髓悬浮细胞进行体外培养,密切观察细胞生长情况.②收集培养至第3周的悬浮细胞,采用免疫细胞化学法进行CD34单克隆抗体鉴定.③选健康雌性SD大鼠30只,采用随机数字法分为移植组和对照组,每组15只(1 d,1,2,4和8周各3只).将经CD34单克隆抗体鉴定后的CD34+细胞移植入脊髓全横断大鼠模型脊髓横断处尾侧.④术后密切观察大鼠后肢运动功能恢复情况,分别在术后1 d,2,4和8周行BBB评分检测大鼠后肢运动功能的恢复.⑤同时行冰冻切片于荧光显微镜下观察绿色荧光细胞的分布情况,并用免疫组织化学法检测CD34+细胞的存活.结果:对照组大鼠第22天死亡1只,进入结果分析29只.①免疫荧光镜下见,培养至两三周的骨髓悬浮细胞中,圆形绿色荧光细胞可达90%以上.②免疫细胞化学染色结果显示,培养至两三周后的骨髓悬浮细胞多数呈CD34阳性,阳性率达(74.6±1.7)%.③两组大鼠BBB评分结果显示,移植组大鼠后肢自主运动功能的恢复明显优于对照组.④移植后2,4和8周时移植组脊髓横断处头尾两侧均可见绿色荧光细胞,且多分布于灰质中,散在或聚集成片;免疫组织化学法可见移植组脊髓横断处头尾两侧切片中均有CD34+细胞散在.结论:移植骨髓CD34+细胞可在脊髓全横断大鼠脊髓中存活并迁移,其大鼠后肢自主运动功能得到部分恢复.
关键词：抗原CD34脊髓损伤神经行为学表现功能恢复
分类号：R3(基础医学)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 30-33,插2 )
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