神经组织细胞特异性蛋白在大鼠羊膜上皮细胞中的表达
娄小倩
孟晓婷
王大伟
陈东
摘要：背景:有证据表明羊膜上皮细胞能够表达神经系统细胞的几乎全部特异性抗原,且可以分泌多种神经营养因子及递质.若羊膜上皮细胞能够代替神经细胞,其神经营养作用必将为治疗神经推行性病变带来广阔前景.目的:检测神经组织细胞特异性抗原在大鼠羊膜上皮细胞中是否表达?设计:重复测量设计.单位:吉林大学第二临床医学院,吉林大学基础医学院组织与胚胎学教研室.材料:实验于2004-10/2005-10在吉林大学基础医学院组织与胚胎学教研室完成.选取清洁级孕12～14 d的Wistar大鼠1只,将分离出的羊膜上皮细胞用于实验.小鼠抗大鼠神经元特异性抗原微管相关蛋白、星形胶质细胞特异性抗原胶质原纤维酸性蛋白、乙酰胆碱转移酶单克隆抗体、兔抗大鼠神经元特异性烯醇化酶和NT-3多克隆抗体(武汉博士德公司);大鼠抗大鼠Musashi抗体(日本庆应义塾大学岗野荣之教授惠赠).方法:取孕12～14d的Wistar大鼠胎盘,剥离羊膜获得上皮细胞,在37℃、体积分数为0.05的CO2环境下,胰蛋白酶消化5 min,加入DMEM/F12培养液,以5×109L-1的浓度接种于培养瓶中.培养3 d后,细胞以1×108L-1的浓度接种于预先涂有多聚赖氨酸的直径35 mm平皿中,用质量浓度为40g/L的多聚甲醛固定20 min.采用免疫细胞化学染色方法对神经元特异性抗原微管相关蛋白、神经元特异性烯醇化酶、星形胶质细胞特异性抗原胶质原纤维酸性蛋白、乙酰胆碱转移酶在羊膜上皮细胞中的表达情况进行检测.主要观察指标:①大鼠羊膜上皮细胞不同培养时间的形态观察.②神经组织细胞特异性抗原在大鼠羊膜上皮细胞中的表达情况.结果:①大鼠羊膜上皮细胞不同培养时间的形态观察:羊膜上皮细胞培养24 h后,细胞扁平呈成纤维细胞样.3～5 d后,胞体饱满,核大而圆,核仁清晰,突起发达,并互相连成网状.②神经组织细胞特异性抗原在大鼠羊膜上皮细胞中的表达情况:培养4 d后免疫细胞化学染色结果可见,羊膜上皮细胞表达Nestin、神经元特异性烯醇化酶、乙酰胆碱转移酶以及Musashi、神经元特异性抗原微管相关蛋白、星形胶质细胞特异性抗原胶质原纤维酸性蛋白.结论:羊膜上皮细胞与神经组织细胞具有一定的同源性,可望作为治疗神经系统疾病新的细胞来源.
关键词：羊膜上皮细胞免疫细胞化学染色法组织细胞大鼠
分类号：R394.2(医学遗传学)
论文发表日期：2006-01-01
页数：4( 158-160,插图25-6 )
英文信息