烧伤血清对大鼠骨髓间充质干细胞基因表达的动态影响
韩冰1
付小兵2
陈伟2
周岗2
孙同柱2
白晓东2
1.解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室,北京市,100037;解放军第一四八医院烧伤科,山东省,淄博市,2553002.解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室,北京市,100037
摘要:目的:观察烧伤大鼠血清对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞基因表达的影响.方法:实验于2003-06/2004-4在解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室完成.①断头法处死Wistar大鼠,取股骨并暴露骨髓腔,用培养基冲洗骨髓腔,将骨髓细胞悬液用密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞并接种于培养瓶,贴壁法培养骨髓间充质干细胞.②用沸水烫伤的方法制作15%TBSAⅢ度烧伤模型.③烧伤3 d后经腹主动脉取烧伤大鼠血液,分离血清备用.④同样取正常大鼠血液,分离血清备用.⑤骨髓间充质干细胞传代后分别用含有体积分数为0.1的正常大鼠血清(正常血清组)和烧伤后3 d大鼠血清(烧伤血清组)的F-12培养基培养24 h及72 h.⑥从处理过的间充质干细胞内提取RNA,反转录为cDNA并以cy3-dUTP和cy5-dUT进行标记为荧光探针.⑦以含有5705种基因的寡核苷酸微阵列检测两组细胞基因表达的差异.结果:①烧伤血清处理不同时间后,两组间充质干细胞对比,均有不同数量的基因表达存在明显差异.②烧伤血清处理24 h后,两组相比较有4条基因表达存在明显差异.③烧伤血清处理72 h后,两组相比较有11条基因表达存在明显差异.④两个时间点差异表达的基因无相同基因.结论:烧伤后大鼠血清刺激间充质干细胞,使其基因表达发生了改变,且随着烧伤血清处理时间的不同,差异表达的基因也发生动态变化.这种改变可能与间充质干细胞受到刺激后参与创面修复有关.
关键词:间质干细胞基因表达烧伤
分类号:R3(基础医学)
资助基金:国家重点基础研究发展计划(973计划)(2005CB522603)国家自然科学基金(30230370;30400172)
论文发表日期:2006-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 7-10 )
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中国临床康复

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北大核心CSTPCD
ISSN:1673-8225
年,卷(期):2006,10(37)
所属栏目:干细胞研究