新生小鼠海马源性神经干细胞体外分离培养细胞群的增殖分化
余资江1
应大君2
崔晓萍2
董世武2
1.贵阳医学院基础医学院解剖学教研室,贵州省贵阳市,5500042.解放军第三军医大学解剖学教研室,重庆市,400038
摘要：目的:从新生小鼠脑海马部取材进行大量细胞克隆,对体外分离培养的神经干细胞进行鉴定,检测所分离细胞群的增殖分化特性.方法:实验于2005-07/10在解放军第三军医大学解剖学教研室实验完成.选用清洁级昆明种新生24 h内小鼠12只,利用神经干细胞条件培养基和单细胞克隆技术,从小鼠脑海马分离并体外培养神经干细胞.连续传代20代后,以免疫荧光细胞化学方法及免疫组织化学方法检测克隆细胞Nestin、BrdU、NeuN、NF-200、MOSP及胶质原纤维酸性蛋白的表达.结果:实验选用昆明种新生24 h内小鼠12只,全部进入结果分析.①神经干细胞的培养及分化:神经干细胞以神经球的方式悬浮生长,无明显突起,原代细胞接种后于第3天开始形成神经球.组成细胞球的细胞圆润饱满,活力状态好,绝大多数在1 d内贴壁,并从细胞球边缘伸出突起,加入含血清的培养基后克隆球48 h内即可见到明显的细胞分化,克隆球周围有细胞移出,7 d后原有的细胞球消失.②神经干细胞的鉴定结果:原代克隆及其亚克隆行Nestin免疫荧光染色,证实克隆内细胞均为Nestin抗原阳性;细胞经BrdU标记后,行BrdU免疫细胞化学染色,部分细胞呈阳性.③神经干细胞的分化鉴定:对诱导分化的细胞分别行NeuN、NF-200、MOSP及胶质原纤维酸性蛋白免疫细胞化学检测,表达均呈阳性.结论:成功分离并获得新生小鼠脑海马神经干细胞,该细胞可连续传代,具备多向分化潜能.
关键词：干细胞神经系统细胞培养技术海马
分类号：R394.2(医学遗传学)
论文发表日期：2006-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1-3,插图41-1 )
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