成纤维细胞生长因子18对兔骨髓基质干细胞体外增殖的影响
田竞1
杨帆2
李秀岩3
李林2
项良碧1
祖启明1
范清宇4
1.解放军沈阳军区总医院骨科,辽宁省沈阳市,1100162.解放军第四军医大学口腔医学院颌面外科,陕西省西安市,7100323.解放军沈阳军区司令部门诊,辽宁省沈阳市,1100054.解放军第四军医大学全军骨肿瘤研究所,陕西省西安市,710038
摘要:目的:构建可稳定表达成纤维细胞生长因子18蛋白的真核表达载体,在体外观察成纤维细胞生长因子18对兔骨髓基质干细胞体外增殖的影响.方法:实验于2002-10/2004-03在西安第四军医大学全军骨肿瘤研究所及口腔医学院完成.①将pGEM-T-成纤维细胞生长因子18-3和pSecTag2B表达载体分别用Kpn Ⅰ和Not Ⅰ酶切后重组pSecTag2B-成纤维细胞生长因子18质粒.②脂质体介导下转染哺乳动物细胞COS-7,获得稳定表达后用细胞上清刺激骨髓基质干细胞.③通过噻唑蓝检测细胞增殖情况.结果:①成功构建pSecTag2B-成纤维细胞生长因子18真核表达载体(电泳可见540 bp的特异条带).②转染哺乳动物细胞COS-7用夹心酶联免疫吸附法检测到了成纤维细胞生长因子18蛋白质的稳定表达(夹心酶联免疫吸附方法检测450 nm处吸光度值,原液及1:10稀释度细胞上清大于阴性对照组2.1倍以上).③用细胞上清刺激骨髓基质干细胞后,实验组骨髓基质干细胞较对照组吸光度值明显增高,在24~72 h其增高具有明显的统计学差异(P<0.01).结论:成纤维细胞生长因子18显著促进兔骨髓基质干细胞体外增殖,提示成纤维细胞生长因子18对于骨髓基质干细胞增殖及分化有调节作用.
关键词:成纤维细胞生长因子骨髓干细胞
分类号:R394.2(医学遗传学)
资助基金:国家自然科学基金(30330610;01Z091)
论文发表日期:2006-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 13-15 )
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