人成釉蛋白抗体的制备及组织表达特异性
田宇1
鲁红1
倪龙兴1
肖明振1
余擎1
蒲勤2
路凡2
1.解放军第四军医大学,口腔医学院,陕西省西安市,7100322.解放军第四军医大学,基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西省西安市,710032
摘要:目的:制备抗人成釉蛋白抗体,观察成釉蛋白在各组织中的表达.方法:实验于2002-03在解放军第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室完成.以重组、纯化的成釉蛋白C端肽为抗原,混入完全/不完全弗氏佐剂,免疫新西兰大白兔,经5次免疫后,颈动脉取血,分离血清并用饱和硫酸铵纯化,制备兔抗人成釉蛋白多克隆抗体,用双向免疫扩散试验和ELISA检测抗体的效价.用Western Blot检测人成釉蛋白的组织表达特异性.结果:①ELISA检测结果:表明兔抗人成釉蛋白多克隆抗体效价达到1:10 000.②Western Blot显示:成釉蛋白在人牙胚组织总蛋白中有特异性表达,相对分子质量约为65 000,在脑、心、肝、脾、肺、肾、胰腺、胸腺、骨骼肌等组织中未见表达条带.结论:制备了抗人成釉蛋白抗体,为研究成釉蛋白在人牙胚中的组织表达以及利用抗体纯化蛋白提供了基础,从蛋白水平证实成釉蛋白为牙胚组织特异性蛋白,并证实人牙胚组织中的成釉蛋白相对分子质量约为65 000.
关键词:人印迹法蛋白质牙胚牙釉质蛋白质类抗体
分类号:R3(基础医学)
资助基金:国家自然科学基金(30300386)军队项目(012089)
论文发表日期:2007-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:3( 18-20 )
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