聚合酶链反应-单链构象多态性银染后胶回收在基因改变检测中的应用
王琦光1
郭志刚2
赖文岩2
朱鲜阳1
1.解放军沈阳军区总医院先心病内科,辽宁省沈阳市,1100162.南方医科大学南方医院心内科,广东省广州市,510515
摘要：目的:探讨聚合酶链反应-单链构象多态性银染后胶回收的方法在基因改变检测中的应用.方法:实验于2004-09/2005-10在南方医院心内科实验室完成.样本来源:于2004-09/2005-08选择南方医院心内科收治的冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)患者123例,均符合WHO冠心病诊断标准,并经心电图、超声心动图、CT确诊.患者均知情同意.聚合酶链反应-单链构象多态性银染方法检测冠心病患者三磷酸腺苷结合盒转运体A1基因改变,对1例怀疑存在基因改变样本的聚丙烯酰胺凝胶采用银染后单链胶回收,以胶回收后的单链聚合酶链反应产物为模板重复聚合酶链反应后进行测序.结果:在对三磷酸腺苷结合盒转运体A1基因Exon7进行单链构象多态性检测时,发现一样本泳带异常,对其样本进行银染后胶回收,结合限制性内切酶酶切,证实此样本存在碱基改变,从而验证了非变性聚丙烯酰胺凝胶银染后胶回收的准确性和可行性.结论:经聚合酶链反应-单链构象多态性银染后的非变性聚丙烯酰胺凝胶胶也可进行胶回收.聚合酶链反应-单链构象多态性银染后胶回收在基因改变检测中可以增强单链构象多态性基因突变检测的准确性,由于其无毒性、成本低及操作简单等优点,更易被实验人员所接受.
关键词：聚合酶链反应-单链构象多态性三磷酸腺苷结合盒转运体A1基因改变银染法胶回收
分类号：R4(临床医学)
资助基金：国家自然科学基金(30471929)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 29-32 )
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