人骨髓基质细胞定向培养为内皮细胞应用于心脏组织工程瓣膜
冯滨1
刘迎龙2
谢宁2
朱晓东2
晏明全1
阮英卯2
1.川北医学院附属南充市中心医院心胸外科,四川省南充市,6370002.中国医学科学院阜外心血管病,北京市,100037
摘要：目的:观察在脱细胞生物瓣支架上种植自体内皮细胞后完成体外构建生物组织工程瓣的可行性.方法:实验于2002-12/2004-12在中国医学科学院阜外心血管病医院先心病研究室和解放军军事医学科学院全军造血干细胞中心实验室完成.①骨髓样品取自军事医学科学院附属医院全军造血干细胞移植中心的健康成人献髓员,从正常成人骨髓中分离骨髓基质细胞进行定向培养和扩增其中的内皮细胞.②十二烷基硫酸钠脱去成人主动脉带瓣管道表面的内皮细胞后作为支架材料;脱细胞的同种生物瓣支架在无菌条件下,剪切成0.8 cm×0.8 cm的大小,种子细胞选择人骨髓基质细胞体外定向培养的内皮细胞,高密度(＞105cm-2)种植于瓣膜支架上静态培养20 d.③分别在静态培养的第7,14,20天结束时取瓣膜片用0.5%硝酸银染色行立体显微镜和扫描电镜观察、摄片.瓣膜被内皮细胞覆盖的面积用百分数表示,以确定其再内皮化率.结果:①5.0×105个骨髓基质细胞体外定向培养的内皮细胞共传8代,最后获得了6.0×1~个内皮细胞,扩增了约1.2×104倍,可以满足高密度种植内皮细胞的需求.②0.03%十二烷基硫酸钠完全脱去了同种生物瓣表面的内皮细胞,而瓣膜的细胞外基质成份在脱细胞前后均无明显变化,其形态学结构保持良好.③内皮细胞与支架复合体静态培养第7,14,20天,再内皮化率分别为65%、85%和90%.结论:骨髓基质细胞定向培养的内皮细胞,经扩增后是瓣膜组织工程研究中种子细胞的又一来源;静态培养条件下基本实现了生物组织工程瓣体外构建的目标,为进一步脉动流培养以及动物实验提供了材料基础.
关键词：心脏瓣膜组织工程骨髓基质细胞内皮细胞支架
分类号：R3(基础医学)
资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）(2001AA216061)国家自然科学基金(30271289)中国博士后科学基金(2003033224)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 264-267,插2 )
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