松质骨源性人成骨细胞的分离培养和细胞密度效应
杨玉生1
孙俊英2
朱伟2
孙荣彬2
1.南京医科大学附属无锡二院骨科,江苏省无锡市,2140022.苏州大学附属第一医院骨科,江苏省苏州市,215006
摘要：目的:通过对人松质骨成骨细胞的培养,寻找人成骨细胞培养最佳途径中细胞密度的相关影响因素,以期掌握人成骨细胞扩增的规律.方法:实验于2005-03/12在江苏省血液病研究所(苏州大学附属第一医院血研所)血栓室完成.①以人工髋关节置换术中切下的股骨头和膝关节置换术中切下的股骨髁的松质骨作为成骨细胞来源,分离培养和鉴定.②以第1代成骨细胞分别按1:2;1:3;1:4的比例传代培养,观察成骨细胞的生长周期.③计数培养后的细胞数,观察细胞密度不同对细胞生长的影响.结果:①细胞的生长及形态特征:原代细胞种植40 h后,可见有少部分成骨细胞贴壁并伸出伪足,80 h后,可见较多的细胞贴壁,以梭形或多角形多见.7～12 d左右细胞形成单层,此时成骨细胞多为梭形,胞浆丰富,透明度高,有核及明显的核仁,细胞整体形态与成纤维细胞相似.传代培养后,细胞多为梭形或多角形,细胞核大,有多个突起,突起相互交叉.随着时间推移细胞逐渐连接成片.②成骨细胞的生长周期:人成骨细胞的生长周期约4 d.③人成骨细胞不同比例传代培养生长情况:1×106个细胞分别按1:2,1:3和1:4传代培养4 d后,收集细胞总数分别为:(2.025±0.063)×106,(1.688±0.052)×106,(1.352±0.059)×106,统计学比较细胞数差异有显著性(P＜0.001).结论:同等数量细胞在密度不同时用相同的时间培养获得细胞总数并不相同,细胞的生长速度与细胞的密度相关,人成骨细胞培养以1:2传代较好.以松质骨取材来源人成骨细胞培养方便和快捷,细胞扩增要达到最佳速度必须掌握好细胞传代的密度.
关键词：细胞培养成骨细胞细胞计数骨质疏松
分类号：R3(基础医学)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 431-434 )
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