大鼠骨髓间充质干细胞分离培养及其生物学特性观察
买霞
陈莉
扎拉嘎胡
战丽艳
徐瑞成
1.武装警察部队医学院细胞生物学教研室,天津市,3001622.武装警察部队医学院细胞生物学教研室,天津市,3001623.武装警察部队医学院细胞生物学教研室,天津市,3001624.武装警察部队医学院细胞生物学教研室,天津市,3001625.武装警察部队医学院细胞生物学教研室,天津市,300162
摘要：目的:分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞并观察其生物学特性.方法:实验于2004-05/2006-04在武装警察部队医学院细胞生物学实验室进行.在无菌条件下分离大鼠胫骨、股骨,用预冷磷酸盐缓冲液冲出骨髓,经Percoll梯度分离方法获得骨髓单个核细胞,接种含体积分数为0.10胎牛血清的IMDM培养基中.对单个核细胞行贴壁培养后,通过倒置光显微镜和透射电子显微镜进行细胞形态学观察,流式细胞术进行细胞周期分析,细胞计数法测定细胞生长曲线,免疫细胞化学染色显示c-kit表达.结果:①倒置光显微镜下观察采用Percoll(1.073 g/mL)分离的骨髓间充质干细胞大小较为均匀,基本上呈梭形或星形的上皮样细胞,传代培养后的细胞体积增大,成纤维样细胞逐渐增多.②透射电子显微镜下观察骨髓间充质干细胞的核质比例较大,核仁大而明显,细胞表面有微绒毛,胞浆内可见核糖体和线粒体,其他细胞器较少,表现出未分化细胞的特征.③细胞生长曲线测定表明接种后第4天细胞进入指数增生期,至第7天进入平台期.④流式细胞术证明G2+S期细胞为11.8%.⑤体积较大的多角形细胞为c-kit阳性,体积较小的成纤维样细胞为阴性细胞,阳性颗粒主要分布在细胞膜和细胞质,细胞核未见表达,阳性细胞比率为55.3%.结论:成功地建立了一种分离培养大鼠骨髓间充质干细胞的方法,获得的细胞生长稳定,增殖活跃,可作为组织工程的种子细胞.
关键词：骨髓间质干细胞大鼠细胞培养免疫细胞化学
分类号：R3(基础医学)
资助基金：武警医学院校科研和教改项目(WY2004-6)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 463-466,后插页2 )
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