骨髓干细胞移植后Western blot免疫印迹分析鼠抗肌萎缩蛋白表达的变化
卢锡林
姚晓黎
冯善伟
冯慧宇
于美娟
欧翠华
柳太云
张成
1.中山大学附属第一医院神经科,广东省广州市,5100802.中山大学附属第一医院神经科,广东省广州市,5100803.中山大学附属第一医院神经科,广东省广州市,5100804.中山大学附属第一医院神经科,广东省广州市,5100805.中山大学附属第一医院神经科,广东省广州市,5100806.中山大学附属第一医院神经科,广东省广州市,5100807.中山大学附属第一医院神经科,广东省广州市,5100808.中山大学附属第一医院神经科,广东省广州市,510080
摘要：目的:Western blot免疫印迹分析骨髓干细胞移植后mdx鼠抗肌萎缩蛋白表达的变化.方法:实验于2004-09/12在中山大学附属第一医院神经科实验室完成.①选取7～8周龄mdx鼠25只,随机数字表法分为骨髓移植4,8,12,16周组、空白对照组,5只/组.另选取4～6周龄C57鼠20只作为供体鼠,10周龄C57鼠5只作为阳性对照组.②各组在移植前均给予照射剂量为7Gy的放疗预处理.放疗完毕后,骨髓移植4,8,12,16周组均进行尾静脉细胞移植,移植细胞数为2×107/只,0.3～0.5 mL;空白对照组、阳性对照组尾静脉输入0.3 mL磷酸盐缓冲液.③骨髓移植4,8,12,16周组分别于对应时间点处死,取其腓肠肌,制备抗肌萎缩蛋白样品,进行抗肌萎缩蛋白Western blot免疫印迹分析,以GAPDH作为内参.结果:25只7～8周龄mdx鼠、5只10周龄C57鼠全部进入结果分析.骨髓干细胞移植后抗肌萎缩蛋白Western Blot免疫印迹分析结果:空白对照组无抗肌萎缩蛋白的表达;骨髓移植4周组仅可见抗肌萎缩蛋白的徽弱表达,dystrophin/GAPDH灰度比值约为0.095±0.267;骨髓移植12周组约为0.218±0.338;随骨髓移植时间的延长抗肌萎缩蛋白表达量逐渐增加,移植后16周的表达量较移植后8周明显增加(0.393±0.385,0.173±0.284;t=6.062,P＜0.05),但仍明显低于阳性对照组1.172±0.328(t=3.14,P＜0.05).结论:骨髓干细胞移植mdx鼠后应用Western Blot免疫印迹分析可干不同时间检测到抗肌萎缩蛋白的表达,且随移植时间延长表达量增多,提示骨髓干细胞移植可长久持续参与受损骨骼肌的修复与再生.
关键词：肌营养不良蛋白免疫印迹法干细胞移植
分类号：R3(基础医学)
资助基金：国家自然科学基金(30370510)广东省博士启动基金(5300783)广东省自然科学基金(2006B36003003)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1256-1258 )
英文信息