脂肪干细胞在体外特定培养液中向软骨细胞表型的分化
徐亮
杨述华
田宏涛
1.华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科,湖北省武汉市,4300302.华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科,湖北省武汉市,4300303.华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科,湖北省武汉市,430030
摘要：目的:应用转化生长因子β1,体外诱导脂肪干细胞向成软骨细胞表型分化,探讨其作为组织工程化软骨种子细胞的可行性.方法:实验于2005-04/2006-06在华中科技大学同济医学院公卫实验室完成.①取大鼠腹股沟处脂肪,酶消化法分离、培养脂肪干细胞,体外传代培养.②取第3代细胞通过转化生长因子β1、地塞米松和维生素C诱导脂肪干细胞向软骨细胞分化.③诱导后14 d观察细胞形态变化,进行阿辛蓝染色检测软骨基质的分泌、免疫组织化学检测细胞Ⅱ型胶原的表达,采用Western-blot和反转录-聚合酶链反应检测诱导前后成软骨相关的Sox9,蛋白聚糖与Ⅱ型胶原的表达.结果:①细胞接种的最初几日,细胞呈圆形,1周后贴壁细胞呈长梭形,体积增大;14 d后贴壁生长细胞基本长满单层,中心细胞排列紧密,形态与骨髓间充质干细胞相似.诱导培养后,细胞形态逐渐由梭型向多角形、多边形转变.诱导14 d后多数细胞呈平坦的多边角形状细胞;其夹杂多角突起状或多角纺锤状细胞.②诱导后阿辛蓝染色示糖胺聚糖均匀分布于基质中.③免疫组织化学染色示基质中Ⅱ型胶原表达阳性.④反转录-聚合酶链反应检测成软骨相关的Sox9、蛋白聚糖、Ⅱ型胶原mRNA表达阳性.⑤Western-blot印迹检测细胞诱导后Ⅱ型胶原蛋白表达阳性.结论:脂肪干细胞在特定培养液的诱导下可向成软骨细胞表型分化,并能分泌软骨细胞特异性基质,有望成为软骨组织工程新的细胞来源.
关键词：干细胞转化生长因子软骨细胞细胞分化脂肪组织/细胞学
分类号：R3(基础医学)
资助基金：国家自然科学基金(30471753)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 1805-1807 )
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