脊髓组织工程的体外构建
谢青松
李立新
黄保胜
付震
胡卫星
鲁艾林
1.南京医科大学第一附属医院神经外科,江苏省南京市,2100292.南京医科大学第一附属医院神经外科,江苏省南京市,2100293.南京医科大学第一附属医院神经外科,江苏省南京市,2100294.南京医科大学第一附属医院神经外科,江苏省南京市,2100295.南京医科大学第一附属医院神经外科,江苏省南京市,2100296.南京医科大学第一附属医院神经外科,江苏省南京市,210029
摘要：目的:观察神经干细胞在聚乳酸-羟基乙酸支架上的生长和分化行为,探讨组织工程体外构建人工脊髓修复脊髓损伤.方法:实验于2005-10/2006-06在南京医科大学第一附属医院中心实验室完成.①在聚乳酸-羟基乙酸支架(孔径200～300 μm,孔隙率90%,聚乳酸/聚羟基乙酸=75:25;山东医疗器械研究所)上种植孕14 d的胚胎大鼠脑细胞,培养7 d.②将培养7 d的聚乳酸-羟基乙酸支架置入含体积分数为0.05的胎牛血清和含脑源性神经营养因子20 μg/L的DMEM/F12培养基中继续培养5 d,诱导其向神经元分化.③用倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞在聚乳酸-羟基乙酸支架上的生长和分化行为;应用免疫组织化学鉴定聚乳酸-羟基乙酸支架上培养的细胞.结果:①神经干细胞生长形态:神经干细胞克隆球充满聚乳酸-羟基乙酸支架孔隙,其形状近似孔L隙的不规则几何形状.②神经干细胞超微结构:诱导分化后,大量神经干细胞长出的神经突触跨越支架孔隙的三维空间结构,布满支架的表面和孔隙,并彼此建立了突触联系.③诱导分化前后的聚乳酸-羟基乙酸石蜡切片免疫组织化学鉴定结果:诱导分化前后免疫组织化学鉴定分别为巢蛋白和微管相关蛋白2抗体阳性,说明诱导分化前是神经干细胞,诱导分化后有神经元形成.结论:聚乳酸-羟基乙酸适合神经干细胞的生长和分化,其孔隙结构规范调节了神经干细胞生长增殖的空间排列,而脑源性神经营养因子调控了神经干细胞的分化方向,可以利用该支架的空间结构和细胞因子适度调控神经干细胞在聚乳酸-羟基乙酸上的生长和分化构建脊髓组织.
关键词：干细胞脑源性神经营养因子细胞分化组织工程脊髓损伤
分类号：R3(基础医学)
资助基金：江苏省卫生厅"135工程"医学重点人才基金(135-57)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 1850-1853 )
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