丹参酮ⅡA对神经祖细胞系C17.2的保护作用
夏文杰1
项鹏2
罗广平1
付涌水1
汪传喜1
江朝富1
1.广州血液中心,广州省广东市,5100952.中山大学干细胞与组织工程研究中心,广东省广州市,510080
摘要：目的:了解丹参酮ⅡA对神经祖细胞系C17.2的保护作用,探讨其可能的作用机制.方法:本实验于2005年起在广州血液中心器官移植配型中心实验室进行.C17.2祖细胞系由澳大利亚新南威尔士大学解剖教研室David Walsh博士惠赠.将C17.2细胞以1×109 L-1的密度接种,用含10%胎牛血清lMDM,37℃、体积分数为0.05 CO2、饱和湿度的CO2培养箱培养,接近融合的C17.2细胞用含0.1 mmol/LEDTA的胰酶室温消化,按1:3的比例传代.C17.2细胞以5×107 L-1的密度接种于96孔板或25 cm2的培养瓶中,用含10%胎牛血清IMDM培养过夜后,加入含4 g/L AAPH(水溶性偶氮引发剂2,2'-偶氮二(2-脒基丙烷)二盐酸盐)无血清的lMDM培养基培养建立神经细胞凋亡模型.C17.2细胞以5×103/孔的密度接种于96孔板中,用含10%胎牛血清IMDM培养过夜后,加入含4 g/LAAPH无血清的IMDM培养基培养.对照组不加入丹参酮ⅡA,实验组分别加入0.02,0.05,0.1,0.2 mg/L丹参酮ⅡA培养8 h,噻唑蓝法检测细胞活性:细胞活性的相对值=(实验组吸光度值/对照组吸光度值)×100%,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果:①AAPH处理8 h后,C17.2细胞被过氧化损害,大多数细胞失去正常的形态,细胞呈圆形,脱落.加入丹参酮ⅡA后,细胞形态基本保持正常,少数细胞呈圆形.②C17.2细胞在IMDM的培养液中,细胞数量是含4 g/L AAPH无血清的lMDM培养基条件下的2.5～3倍.浓度为0.02,0.05,0.1 mg/L的丹参酮ⅡA对C17.2细胞有保护作用,质量浓度大于0.2 mg/L丹参酮ⅡA对C17.2细胞保护作用降低.③AAPH作用前大部分C17.2细胞的线粒体完整,有少量的早期凋亡细胞和凋亡细胞,AAPH作用后凋亡细胞总数、凋亡细胞明显增加.丹参酮ⅡA处理组可以明显减少早期凋亡细胞.结论:在体外丹参酮ⅡA对神经细胞具有抗凋亡的作用,可以保护神经细胞.
关键词：丹参酮ⅡA细胞凋亡神经细胞
分类号：R2(中国医学)
资助基金：广州市医药卫生科技项目(2006-YB-140)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 2046-2049 )
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