评价Ti-6Al-7Nb合金的细胞相容性及其组织相容性
李凯1
刘彦普1
杨涛1
闫志伟1
李璇2
1.解放军第四军医大学口腔医学院口腔颌面外科,陕西省西安市,7100322.解放军第一五三医院检验科,河南省郑州市,453000
摘要：目的:评价Ti-6Al-7Nb合金的细胞相容性和组织相容性.方法:实验于2006-05/10在解放军第四军医大学口腔生物学实验室完成.实验分组:①细胞毒性试验:按照GB/T16886.5-2003《医疗器械生物学评价》体外细胞毒性的试验方法进行.分为5组:Ti-6Al-7Nb合金组、Ti-6Al-4V合金组、纯钛组、纯铅组、空白对照组.将对数生长期的L-929细胞用胰蛋白酶消化后制备成浓度为1×107L-1的细胞悬液,接种于培养板,待细胞贴壁生长后弃去原培养液.磷酸盐缓冲液冲洗后分别加入4种金属材料的浸提液和空白对照组的DMEM培养液.培养1,3,5,7 d在倒置相差显微镜下观察细胞形态.每孔加入MTT后继续培养,抽出浸提液,磷酸盐缓冲液冲洗后加入二甲基亚砜,在490 nm波长下用酶联免疫检测仪上测定吸光度值(A值),计算细胞相对增殖率,相对增殖率=(实验组A值/空白对照组A值)×100%.相对增殖率为≥100%,80%～99%,50%～79%,30%～49%,0～29%时细胞毒性分别为0,1,2,3,4级.②急性溶血性试验:抽取新西兰兔血10 mL,制成新鲜抗凝稀释兔血.将Ti-6Al-7Nb合金、Ti-6Al-4V合金各5 g浸泡入10 mL生理盐水的试管.阳性对照组及阴性对照组分别为10 mL的蒸馏水及生理盐水.每个试管中加0.2 mL稀释兔血,离心后取上清液,用分光光度计在波长为545 nm波长下测吸光度值,计算溶血率,溶血率=(Dt-Dnc)/(Dpc-Dnc)×100%.Dt,Dnc,Dpc分别代表Ti-6Al-7Nb合金组或Ti-6Al-4V合金组、阴性对照组、阳性对照组的A值.③短期皮下埋植试验:在10只新西兰大白兔皮下至肌肉间制备皮囊植入材料.囊底至切口＞10 mm,两皮囊间相隔＞10 mm,使植入材料相互之间不接触.每只兔植入4种金属材料各1个.于术后1,4,12周麻醉后处死动物各3只,取材料周围组织行苏木精-伊红染色,观察炎性细胞数量及种类,使用电子测量尺Version 1.0测量纤维包膜厚度.参照GB/T16175-1996中的评价标准确定组织反应程度,其反应程度主要通过试验区组织中炎性细胞数量及种类变化,纤维包膜形成与否及厚度变化评价.结果:①细胞毒性评价:3种钛金属材料浸泡7 d时L-929细胞形态正常,生长近汇合,排列密集规则;纯铅组可见大量细胞死亡.浸泡7 d时Ti-6Al-7Nb、Ti-6Al-4V、纯钛、纯铅相对增殖率分别为100%,97%,101%,9%.经过评价,Ti-6Al-7Nb合金和纯钛的细胞毒性为0级,Ti-6Al-4V合金为1级,纯铅为4级.②细胞相容性评价:Ti-6Al-7Nb合金组、Ti-6Al-4V合金组溶血率分别0.95%,1.08%,低于国家标准规定的5%界限,无明显的急性溶血性.③组织相容性评价:肉眼可见材料被纤维包膜包裹,3组钛金属周围包膜透明且较薄,纯铅组包膜较厚呈半透明乳白色.术后12周时3种钛金属材料周围炎性细胞密度较低,包膜致密且进一步变薄.纯铅组炎性细胞数量及包膜厚度均较3种钛金属为高,组织反应较重.Ti-6Al-7Nb合金和纯钛炎性细胞/组织反应程度均为Ⅰ级,Ti-6Al-4V合金分别为Ⅰ、Ⅱ级,纯铅分别为Ⅱ、Ⅲ级.结论:Ti-6Al-7Nb合金具有良好的细胞相容性和组织相容性,是一种理想的生物医用钛合金.
关键词：生物相容性Ti-6Al-7Nb合金细胞毒性试验急性溶血性试验短期皮下埋植试验生物材料
分类号：R318(医用一般科学)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 2406-2410 )
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