地塞米松在家兔脂肪基质干细胞定向诱导为成骨细胞的作用
黎洪棉
高建华
鲁峰
李华
1.南方医科大学南方医院整形外科,广东省广州市,5105152.南方医科大学南方医院整形外科,广东省广州市,5105153.南方医科大学南方医院整形外科,广东省广州市,5105154.南方医科大学南方医院整形外科,广东省广州市,510515
摘要：目的:观察不同浓度地塞米松对家兔脂肪基质干细胞生长、增殖及向成骨细胞分化的影响.方法:实验于2006-11/2007-01在南方医科大学组织工程研究中心完成.实验材料:成年新西兰大白兔购于南方医科大学实验动物中心(机构许可证号SYXK(粤)2005-0058).实验方法:①脂肪基质干细胞获取:取成年新西兰大白兔腹股沟皮下脂肪组织一二毫升,分离培养脂肪基质干细胞,井按1:3进行传代培养.选取生长良好P3代细胞进行免疫组织化学染色测定CD44抗原表达.并于第3,7,14天观察细胞增殖情况.②脂肪基质半细胞成骨诱导:成骨诱导液由不同浓度地塞米松、50 mg/L的维生素C、10 mmol/L的β-磷酸甘油和DMEM完全培养基组成.实验分6组:0 mol/L地塞米松组、10-8 mol/L地塞米松组、10-7 mol/L地塞米松组、10-6mol/L地塞米松组、10-5mol/L地塞米松组、对照组.选择生长良好P3代兔脂肪基质干细胞,用0.25%胰酶消化3～5 min,制成单细胞悬液,调整细胞密度为1×104,接种于25 cm2的培养瓶中,在体积分数为0.05的C02饱和湿度、37℃恒温培养箱培养.24 h后所有诱导组更换为成骨诱导培养液,进行成骨细胞诱导分化处理,记为诱导第0天,对照组换DMEM完全培养液.诱导期间,每隔二三天换1次成骨诱导液,对照组换1次常规DMEM完全培养液.③第7,14,21天茜素红染色鉴定成骨细胞特性,观察不同浓度地塞米松对兔脂肪基质干细胞的生长、增殖及向成骨细胞分化的影响.结果:①地塞米松对脂肪基质干细胞增殖的影响:与对照组相比较,10-6,100-5 mol/L组细胞数目明显减少(t=2.862 3,3.424 5.3.520 3,3.959 4,2.264 1,2.701 2.P＜0.05).②地塞米松对脂肪基质干细胞成骨分化的影响:光镜下观察整个诱导分化期,对照组未观察到钙化结节形成,0 mol/L地塞米松组只观察到个别钙化结节形成.在诱导第14天,10-5,10-6,10-7,10-8 mol/L地塞米松组均可观察到少数钙化结节形成,10-5,10-6,10-7 mol/L组间钙化结节数差异无显著性意义(t=0.557 1, 0.592 9.1.114 2.P＞0.05),但钙化结节数目明显多于10-8 mol/L组(t=5.496 0,6.281 1,6.364 0,P＜0.05).在诱导第21天;10-5,10-6,10-7 mol/L组均可观察到大量钙化结节形成,均明显多于10-8 mol/L组(t=6.270 3,6.406 5;5.634 9,P＜0.05).结论:＞10-7 mol/L高浓度地塞米松对脂肪基质干细胞的生长、增殖有明显抑制作用;在其他镌导条件一致的情况下,10-7 mol/L地塞米松最有年于脂肪基质干细胞向成骨细胞分化.
关键词：干细胞脂肪组织细胞培养激素类生物医学工程
分类号：R394.2(医学遗传学)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 3896-3899 )
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