胎盘免疫调节因子对细胞因子诱导的杀伤细胞超微结构及免疫表型的调节作用
张学荣
蒙怡
舒雨雁
韦敏
石庆秋
徐阳曦
1.广西医科大学医学科学实验中心蛇毒研究所,广西壮族自治区南宁市,5300212.广西医科大学医学科学实验中心蛇毒研究所,广西壮族自治区南宁市,5300213.广西医科大学医学科学实验中心蛇毒研究所,广西壮族自治区南宁市,5300214.广西医科大学医学科学实验中心蛇毒研究所,广西壮族自治区南宁市,5300215.广西医科大学医学科学实验中心蛇毒研究所,广西壮族自治区南宁市,5300216.广西医科大学医学科学实验中心蛇毒研究所,广西壮族自治区南宁市,530021
摘要：目的:通过电子显微镜、流式细胞仪观察经胎盘免疫调节因子处理的细胞因子诱导的杀伤细胞超微结构及免疫表型变化,了解胎盘免疫调节因子的免疫调节活性.方法:实验于2006-02/2007-01在广西医科大学医学科学实验中心重点实验室进行.实验材料:重组人干扰素γ和白细胞介素1α为Peprotech公司产品.重组人白细胞介素2和抗人CD3单克隆抗体为北京远策药业有限公司产品.实验方法:①胎盘免疫调节因子的制备:将新鲜经检人胎盘去筋膜,生理盐水冲净、剪碎匀浆,置-20 ℃ 48 h后,反复冻融3次,用生理盐水透析,取透析外液,过虑除菌,分装,抽样做有关鉴定实验.②细胞因子诱导的杀伤细胞的制备:抽取健康自愿者静脉血20 mL,用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞,加RPMI1640培养液调整细胞的密度至1×109 L-1,放于50 mL培养瓶中培养.于当天加入1×106 U/L干扰素γ,置于37 ℃、50 mL/L CO2孵育箱中培养24 h.次日将悬浮的细胞转移到6孔板培养中,分别加入终浓度为100 mg/L的PHA、3×105 U/L白细胞介素2、133 μg/L抗CD3 mAb及1×105 U/L白细胞介素1α,每3 d半量换液1次,同时补加白细胞介素2至3×105 U/L.将培养14 d细胞因子诱导的杀伤细胞以5×109 L-1接种于24孔板,实验组中加入一定剂量的胎盘免疫调节因子诱导,对照组加入等量生理盐水,继续培养72 h.③实验评估:制备电镜标本,观察细胞超微结构.采用流式细胞术测定细胞因子诱导的杀伤细胞CD4+、CD8+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD25+、HLA-DR、CD3+CD56+、CD80+百分含量.结果:①细胞因子诱导的杀伤细胞表型分析:实验组CD4+、CD8+和CD3+CD4+明显低于对照组[实验组:(8.40±8.15)%,(33.10±4.61)%,(7.98±12.65%);对照组:(39.43±9.16)%,(58.90±11.35)%,(31.30±5.94)%,P＜0.05];实验组CD3+CD8+、CD25+表达明显高于对照组[实验组:(30.50±2.56)%,(24.8±6.31)%;对照组:(15.90±7.35)%,(0.56±0.21)%,P＜0.05].②透视电镜下观察细胞因子诱导的杀伤细胞超微结构特征:与对照组相比,实验组细胞因子诱导的杀伤细胞线粒体深染,溶酶体增加,异染色质比例增加,微绒毛肿胀及增长等.结论:胎盘免疫调节因子能促使细胞因子诱导的杀伤细胞超微结构及细胞表型发生明显变化:细胞因子诱导的杀伤细胞线粒体深染,溶酶体增加,异染色质比例增加,微绒毛肿胀增长,CD3+CD8+、CD25+细胞百分比升高,CD4+、CD8+和CD3+CD4+细胞百分比降低.
关键词：胎盘免疫调节因子CIK细胞超微结构细胞表型
分类号：R329.2(人体形态学)
资助基金：广西科技厅科研项目(桂科能0443001-17)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 4461-4465 )
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