应用纳米晶胶原基骨体外构建组织工程骨
夏青1
沈铁城1
黄永辉1
许文荣2
1.江苏大学附属医院骨科,江苏省镇江市,2120012.江苏大学医学技术学院,江苏省镇江市,212001
摘要：目的:应用组织工程技术,建立体外诱导人骨髓间充质干细胞,与纳米晶羟基磷灰石/胶原骨共培养的人工骨模型,探求细胞与纳米晶胶原基骨结合的最佳模式.方法:实验于2005-09/2006-09在江苏大学医学技术学院中心实验室完成.①实验材料:纳米晶胶原基骨材料由清华大学材料系崔福斋等人研制.骨髓取自骨科取髂骨患者(男性,30岁,患者知情同意).②实验干预:全骨髓法体外培养骨髓间充质干细胞并扩增,应用成骨诱导剂诱导向成骨细胞表型转化.取纳米晶胶原基骨材料经60Co照射灭菌,无水乙醇疏水化,三蒸水洗去乙醇等处理制备支架材料.细胞与支架材料复合培养.③实验分组:骨髓间充质干细胞培养至第3代后分为两组:复合材料后加成骨诱导剂组:骨髓间充质干细胞先与纳米晶胶原基骨复合培养3 d后再加入成骨诱导剂;成骨细胞复合材料组:骨髓间充质干细胞在诱导成骨细胞后与纳米晶胶原基骨复合培养.④实验评估:记录第3代骨髓间充质干细胞生长曲线.将诱导后细胞分别进行碱性磷酸酶染色、Von Kossa染色.扫描电镜比较两组复合物经体外孵育2周后,细胞在其中生长情况.结果:①细胞生长情况:倒置显微镜下观察原代培养的骨髓细胞增殖迅速,基本都呈形态均一成纤维样细胞,10～12 d左右即可长满,并可稳定传代,传代细胞7～9 d即可传代.诱导培养后的细胞呈现典型的成骨细胞形态和生物学特征.构建出骨髓间充质干细胞与骨组织共培养的模型.②体外复合后细胞生长及基质分泌情况:细胞可在纳米晶胶原基骨内表面良好贴壁,复合材料后加成骨诱导剂组,细胞贴附,但成骨细胞少见;成骨细胞复合材料组,细胞数量明显较前者多.复合培养8 d,分布于支架材料上的细胞大量增殖、分泌细胞外基质.第14天,大量细胞在材料表面和孔隙中生长.细胞之间广泛存在突起连接,局部有胶原分泌,且可见成骨细胞形成.结论:证实纳米晶胶原基骨适合种子细胞的贴附、生长和增殖,经成骨诱导后的细胞较骨髓间充质干细胞更易与材料贴附、增殖.
关键词：纳米晶胶原基骨间质干细胞组织工程组织构建
分类号：R318(医用一般科学)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 4492-4495 )
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