三种不同培养条件下兔关节软骨细胞增殖速率的差别
吴剑宏1
王秋根2
张秋林1
汤旭日1
汪方1
邓迎生1
谢杨1
官正茂1
王谦1
杨常委1
1.解放军第二军医大学长海医院骨科,上海市,2004332.上海交通大学附属第一人民医院骨科,上海市,201620
摘要：目的:观察兔关节软骨细胞在3种不同培养条件下增殖速率的差别.方法:实验于2004-10/2006-10在上海长海医院血管外科实验室完成.取4周龄新西兰雄性兔6只,利用机械与酶消化的方法获得均一性兔关节软骨细胞,在单层培养条件下增殖至第2代;将第2代细胞在高密度条件下转入藻酸盐凝胶24孔培养介质,进行三维培养.根据实验目的,将24孔培养板分为单层培养对照组,三维培养组(培养液不含胰岛素样生长因子Ⅰ),含胰岛素样生长因子Ⅰ三维培养组(培养液含50 μg/L胰岛素样生长因子Ⅰ),每日在倒置相差显微镜下观察软骨细胞的生长状态,进行细胞计数1周,绘制细胞生长曲线,比较3种不同培养条件下兔关节软骨细胞的增殖速率.结果:①单层培养细胞24 h后开始贴壁生长,细胞形态呈多角形、星形、圆形,72 h后,倒置显微镜下观察细胞增殖数目明显增多,细胞增殖呈片状;三维培养条件下的软骨细胞,刚接种至藻酸钠凝胶时,细胞形态为圆形;三维培养(含胰岛素样生长因子Ⅰ)体系中的软骨细胞从转入三维培养的第3天起,发现细胞出现分裂增殖,局部有细胞团族形成,第7天,凝胶中开始有大量的细胞团族形成.在培养过程中,三维培养软骨细胞形态始终保持圆形.②1周内,单层培养条件下的软骨细胞增殖速率要明显高于三维培养组;含胰岛素样生长因子Ⅰ三维培养组的软骨细胞增殖速率明显高于不含胰岛素样生长因子Ⅰ三维培养组.结论:单层培养方法短期内(1周)对软骨细胞的增殖作用要优于三维培养方法;胰岛素样生长因子Ⅰ对三维培养条件下关节软骨细胞具有促进增殖的作用.
关键词：胰岛素样生长因子Ⅰ关节软骨细胞三维培养藻酸盐细胞培养
分类号：R329.2(人体形态学)
资助基金：上海市科委科技攻关计划(034119830)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 4512-4515 )
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