血管内皮生长因子对佐剂性关节炎滑膜细胞基质金属蛋白酶3及基质金属蛋白酶9表达的影响
莫汉有
周润华
王晓桃
杨敏
覃央
陈蓓莉
黄巍
莫东华
1.桂林医学院附属医院风湿免疫科,广西壮族自治区桂林市,5410002.桂林医学院附属医院风湿免疫科,广西壮族自治区桂林市,5410003.桂林医学院附属医院风湿免疫科,广西壮族自治区桂林市,5410004.桂林医学院附属医院风湿免疫科,广西壮族自治区桂林市,5410005.桂林医学院附属医院风湿免疫科,广西壮族自治区桂林市,5410006.桂林医学院附属医院风湿免疫科,广西壮族自治区桂林市,5410007.桂林医学院附属医院风湿免疫科,广西壮族自治区桂林市,5410008.桂林医学院附属医院风湿免疫科,广西壮族自治区桂林市,541000
摘要:目的:观察血管内皮生长因子对佐剂性关节炎滑膜细胞质金属蛋白酶3及质金属蛋白酶9表达的影响,并探讨其意义.方法:实验于2006-02/12在桂林医学院实验中心完成.①实验材料:清洁级8周龄雄性Wistar大鼠6只,血管内皮生长因子为Peprotech EC LTD公司产品,基质金属蛋白酶3(扩增369 bp)上游引物、下游引物,基质金属蛋白酶9(扩增405 bp)上游引物、下游引物均购自晶美公司.②实验干预:先用弗氏完全佐剂造Wistar大鼠模型;造模20 d后取Wistar大鼠右后足滑膜细胞进行原代培养.③实验分组:实验分为血管内皮生长因子组:取P2代细胞接种于6孔培养板,分别加入终浓度为5,25,50μg/L血管内皮生长因子;对照组:不加血管内皮生长因子.④实验评估:取病理切片观察滑膜细胞形态学改变;采用半定量反转录聚合酶链反应检测Wistar大鼠佐剂性关节炎滑膜细胞基质金属蛋白酶3及基质金属蛋白酶9的m-RNA表达.结果:①培养细胞的形态学观察:原代培养14 d滑膜细胞从组织块边缘逸出,21 d密集生长开始传代;传代细胞48 h可明显分辨出树突样细胞、巨噬细胞样细胞和成纤维细胞样细胞;传至21代,细胞生长及特性稳定.②病理切片:滑膜组织有中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞浸润,滑膜细胞增生、排列紊乱,纤维素渗出,胶原纤维沉着,纤维素样坏死,呈滑膜炎表现.③基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶9的mRNA表达:对照组基质金属蛋白酶3 mRNA表达相对灰度值与血管内皮生长因子终浓度5,25,50 μg/L组比较,差异有显著性意义(0.32±0.03,0.77±0.06,1.12±0.12,1.59±0.02,P<0.05);对照组基质金属蛋白酶9 mRNA表达相对灰度值与血管内皮生长因子终浓度5,25,50μg/L组比较,差异有显著性意义(0.47±0.07,0.50±0.10,0.91±0.10,1.31±0.06,P<0.05);基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶9mRNA表达随血管内皮生长因子浓度的加大表达增加.结论:血管内皮生长因子以剂量递增的方式对体外培养的佐剂性关节炎滑膜细胞基质金属蛋白酶3及基质金属蛋白酶9的表达有促进作用.
关键词:关节炎实验性滑膜血管内皮生长因子类基质金属蛋白酶类逆转录聚合酶链反应组织构建
分类号:R684.3(骨科学(运动系疾病、矫形外科学))
资助基金:广西卫生厅科研项目(Z2006204)
论文发表日期:2007-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 5307-5310 )
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中国组织工程研究与临床康复

中国组织工程研究与临床康复

北大核心CSTPCD
ISSN:1673-8225
年,卷(期):2007,11(27)
所属栏目:研究与报告