人脂肪干细胞体外培养特性及成脂成软骨分化
郭宝锋
尹维田
刘浩宇
魏壮
1.吉林大学中日联谊医院手外科,吉林省长春市,1300332.吉林大学中日联谊医院手外科,吉林省长春市,1300333.吉林大学中日联谊医院手外科,吉林省长春市,1300334.吉林大学中日联谊医院手外科,吉林省长春市,130033
摘要：目的:观察人脂肪组织间充质干细胞体外分离培养及成脂、成软骨诱导分化的生物学性状,探讨其作为软骨组织工程种子细胞的可行性.方法:实验于2006-08/2007-03在吉林大学中日联谊医院前列腺疾病防治研究中心完成主要工作.实验方法:①人脂肪组织来源于健康成年女性腹部吸脂术,酶消化法分离出脂肪间充质干细胞,接种于含体积分数为0.10胎牛血清的高糖DMEM培养基进行原代培养.②取第3代脂肪间充质干细胞,采用细胞计数法测定细胞生长曲线,流式细胞仪测定CD13、CD34抗原的表达,免疫荧光法测定CD34抗原的表达.③取第3代脂肪间充质干细胞,用含体积分数为0.10胎牛血清、0.5 mmol/L IBMX、1 μmol/L地塞米松、10 μmol/L胰岛素的成脂诱导培养基和含体积分数为0.01胎牛血清、10 μg/L转化生长因子β1、50 nmol/L抗坏血酸、6.25 mg/L胰岛素的成软骨诱导培养基分别诱导分化.④每天用倒置显微镜观察细胞形态及增殖变化,油红"O"、AB-PSA染色和Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色检测成脂、成软骨分化情况.结果:①体外培养的脂肪间充质干细胞呈扁平的长梭形,细胞形态均一,传代稳定.间质细胞相关标志CD13和干细胞相关标志CD34表达阳性.②定向诱导后表现出脂肪细胞和软骨细胞特性.经成脂诱导,细胞内出现空泡,油红"O"染色呈红色;经成软骨染色,AB-PSA染色呈紫红色,Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色胞浆呈棕黄色.结论:脂肪干细胞能向软骨细胞方向诱导分化,可作为软骨组织工程种子细胞.
关键词：组织工程干细胞软骨
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：吉林省科技发展计划(200505164)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 6625-6628 )
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