系统性红斑狼疮患者骨髓间充质干细胞的体外扩增及鉴定
谌蓉1
张缪佳2
王嫱2
谈文峰2
柯瑶2
刘晓华2
1.南京医科大学第二附属医院风湿免疫科,江苏省南京市,2100112.南京医科大学第一附属医院风湿免疫科,江苏省南京市,210029
摘要:目的:探讨系统性红斑狼疮患者骨髓间充质干细胞的体外培养方法、生物学功能、表面标记表达的异常与否.方法:选择2004-12/2005-12于南京医科大学第一附属医院风湿科初诊为系统性红斑狼疮患者5例,均为女性,年龄20~35岁,诊断符合美国风湿病学院(ARA)1997年修订的诊断标准,所有患者知情同意后,获取骨髓标本.采用密度梯度离心法和贴壁筛选法分离培养5例系统性红斑狼疮患者骨髓间充质干细胞,观察其形态学改变,测定其生长曲线,采用流式细胞仪鉴定骨髓间充质干细胞表面标记物及分析细胞周期.结果:5例系统性红斑狼疮患者骨髓间充质干细胞均分离培养成功,其中1例因出现细菌污染而终止培养.①传代细胞生长较原代要快,细胞在8~10 d即可达到90%融合.对P1、P2代细胞生长曲线进行观察,发现这2代细胞具有以下共同特征:传代培养的潜伏期为1~3 d,第4天起呈对数增长,至第7天达到高峰,之后进入平台期.②流式细胞术检测间充质干细胞细胞表面抗原显示,细胞高表达CD105、CD13、CDg0、CD73,而CD34、CD45、CD38、CD33阴性,3代以后的骨髓间充质干细胞纯度达到了95%以上,基本上排除了骨髓单个核细胞和巨噬细胞的污染.③间充质干细胞的周期分析显示,扩增后的间充质干细胞9.46%的细胞处于S/G2/M期,90.54%处于G0/G1期.结论:系统性红斑狼疮患者骨髓间充质干细胞体外可有效分离培养,所培养扩增的细胞成分单一,且保持干细胞特性,适于以后临床应用.
关键词:系统性红斑狼疮间充质干细胞生物学特性
分类号:R593.2(全身性疾病)
论文发表日期:2007-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 7385-7388 )
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中国组织工程研究与临床康复

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北大核心CSTPCD
ISSN:1673-8225
年,卷(期):2007,11(37)
所属栏目:干细胞实验技术方法