慢病毒介导碱性成纤维细胞生长因子基因转染促进半月板纤维软骨细胞的增殖与基质合成
张经纬1
冯建翔1
徐荣明1
赵金忠2
曾炳芳2
1.宁波市第六医院骨科,浙江省宁波市,3150402.上海市第六人民医院骨科,上海市,200223
摘要：目的:碱性成纤维细胞生长因子是一种作用广泛的修复始动因子,能有效地促进多种细胞的增殖和基质合成功能.借助慢病毒载体进行碱性成纤维细胞生长因子基因转染半月板纤维软骨细胞,观察半月板纤维软骨细胞的增殖与基质合成情况.方法:实验于2004-05/2005-11在上海市四肢显微外科实验室完成.①实验材料:ViraPower慢病毒载体系统;3个月龄新西兰大白兔3只.②实验过程和分组:分离培养兔半月板纤维软骨细胞,待培养的第1代细胞生长至60%融合时,将细胞与克隆有碱性成纤维细胞生长因子基因的重组慢病毒载体悬液共培养,定义为实验组细胞;同时设立对照组细胞,与不携带任何基因的慢病毒悬液共培养;空白组细胞,未接受外加处理.③转染后48 h用酶联接免疫吸附剂测定方法检测3组半月板细胞培养液中碱性成纤维细胞生长因子的表达;激光流式细胞仪检测细胞周期,3H-脯氨酸摄人法检测胶原合成;转染后第2,4,6,8天用四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖.结果:①与重组慢病毒共培养48 h后,在实验组细胞培养液中检测到碱性成纤维细胞生长因子的表达,而对照组和空白组细胞的培养液中未能检测到碱性成纤维细胞生长因子的表达;共培养6 d后实验组细胞吸光度高于对照组和空白组(P＜0.01).②实验组细胞DNA合成前期、DNA合成期、分裂前期及分裂期的时间较对照组和空白组缩短(P＜0.05).③实验组细胞胶原高于对照组和空白组.结论:利用慢病毒转基因技术能有效地将碱性成纤维细胞生长因子基因转染入半月板纤维软骨细胞,继而促进半月板细胞的增殖和基质合成,有可能为治疗半月板损伤提供新的方法.
关键词：慢病毒属成纤维细胞生长因子2半月板胫骨基因组织构建
分类号：R329.2(人体形态学)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 8267-8270 )
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