黄芪诱导骨髓间充质干细胞分化进程中细胞内钙离子浓度的动态变化
王新生1
崔慧先1
刘华2
孙黎2
1.河北医科大学解剖教研室,河北省石家庄市,0500172.河北北方学院实验中心,河北省张家口市,075000
摘要:目的:从细胞内钙离子浓度这一视角切入,验证黄芪提取物可诱导骨髓间充质干细胞向神经干细胞分化的作用,并观察黄芪注射液在骨髓间充质干细胞分化进程中的诱导效应.方法:实验于2007-03/05在河北北方学院中心实验室完成.①实验方法:取1只Wistar大鼠,麻醉后分离股骨和胫骨,D-Hanks液冲洗骨髓腔,离心弃上清,加入含体积分数为0.15胎牛血清的L-DMEM培养基重悬,调整细胞浓度为1×109 L-1接种,达80%~90%融合后消化传代.取第4代骨髓间充质干细胞,加入黄芪注射液至终浓度为100 mg/L进行诱导分化.②实验评估:观察细胞形态学变化.以免疫细胞化学技术检测诱导5 h后细胞巢蛋白的表达.使用流式细胞仪检测诱导前及诱导后10,30,60,120,300 min钙离子探针fluo-3-AM的平均荧光强度.结果:①诱导后细胞形态变化:诱导5 h后细胞体积增大,胞核固缩,核质比减小,有细长突起形成.②诱导后细胞内巢蛋白的表达:免疫细胞化学检测诱导后可见巢蛋白阳性细胞.③诱导不同时相细胞内钙离子浓度的变化:与诱导前比较,诱导10,30 min后细胞内钙离子浓度均明显下降(P<0.01);诱导60 min后有所上升,虽然仍低于诱导前浓度但差异无显著性意义(P>0.05);诱导120 min后达最高点(P<0.01);诱导300 min后胞内钙离子浓度下降至诱导前水平(P>0.05).结论:黄芪注射液可诱导骨髓间充质干细胞向神经干细胞分化,且细胞内钙离子浓度伴随分化过程出现曲线波动,提示钙离子介导的信号通路可能参与细胞分化.
关键词:黄芪骨髓间充质干细胞神经干细胞钙离子
分类号:R394.2(医学遗传学)
论文发表日期:2007-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 8469-8472 )
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