过度表达突变核纤层蛋白A受精卵移植至假孕鼠体内的成活能力
李燕辉
周刚
梁红业
刘卉
吴白燕
1.北京大学医学部医学遗传学系,北京市,1000832.北京大学医学部医学遗传学系,北京市,1000833.北京大学医学部医学遗传学系,北京市,1000834.北京大学医学部医学遗传学系,北京市,1000835.北京大学医学部医学遗传学系,北京市,100083
摘要：目的:制备Hutchinson-Gilford早老症转基因小鼠模型,观察突变的核纤层蛋白A对小鼠受精卵着床和成活情况的影响.方法:实验于2004-09/2007-04在北京大学医学部医学遗传学系和中国农业大学生物技术国家重点实验室完成.①实验方法:将缺失了第11外显子末端150个碱基的LMNA基因cDNA克隆到pcDNA3.1载体,应用原核显微注射方法将线性化的pcDNA3.1-mutant LMNA注射到小鼠受精卵的雄原核,再将注射后的受精卵移植至假孕鼠的输卵管.②实验评估:观察受精卵的着床和成活情况.通过聚合酶链反应检测着床的胚胎,鉴定有无阳性转基因动物.结果:①178只注射pcDNA3.1-mutant LMNA后的存活受精卵移植至假孕鼠输卵管后,出生13只子代鼠,出生率只有7%;58只注射pcDNA3.1-mutant LMNA后的存活受精卵移植到假孕鼠输卵管后,在移植后12～15 d的受体母鼠子宫内收集到1只活胚和5只死胚.②聚合酶链反应方法检测所收集到的胚胎,没有得到pcDNA3.1-mutant LMNA阳性转基因鼠.在着床的胚胎中也没有检测到pcDNA3.1-mutant LMNA.结论:过量表达的突变核纤层蛋白A对小鼠受精卵有致死性,只有无目的基因整合的受精卵才能存活至出生.
关键词：早衰核蛋白类转基因细胞移植
分类号：R617(外科手术学)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 8661-8664 )
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