绿色荧光蛋白标记对大鼠骨髓间充质干细胞生长的影响
杨朝鲜1
周玲2
马芳3
夏庆杰4
陈清英4
1.泸州医学院神经生物学研究室,四川省泸州市,6460002.泸州医学院附属医院内分泌科,四川省泸州市,6460003.四川大学华西组织胚胎学与神经生物学教研室,四川省成都市,6100414.四川大学华西分子遗传实验室,四川省成都市,610041
摘要：目的:观察腺病毒pAdEasy系统携带绿色荧光蛋白对骨髓间充质干细胞的标记效率及标记对骨髓间充质干细胞生长的影响,为进一步追踪研究骨髓间充质干细胞奠定基础.方法:实验于2006-11/2007-03在四川大学华西组织胚胎学与神经生物学实验室完成.①实验材料:成年雄性SD大鼠,体质量100～120 g,由四川大学实验动物中心提供.实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准.②实验方法:采用密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞,传代扩增,应用免疫细胞化学方法对培养的骨髓间充质干细胞进行鉴定.将生长到约80%融合的第3代骨髓间充质干细胞随机分为绿色荧光蛋白标记组和对照组.绿色荧光蛋白标记组加入1:100稀释的腺病毒(pAdEasy-1-pAdTrack-CMV)上清液,对照组加入磷酸盐缓冲液.③实验评估:观察绿色荧光蛋白标记对骨髓间充质干细胞生长曲线的影响.结果:体外培养的原代骨髓间充质干细胞24 h内可见有少量贴壁细胞,8～10 d左右达到70%～80%汇合.免疫细胞化学检测第3代骨髓间充质干细胞显示,CD44和CD90表达阳性,而CD14和CD34表达阴性.生长曲线表明,绿色荧光蛋白标记对骨髓间充质干细胞增殖无明显影响.结论:腺病毒pAdEasy系统携带绿色荧光蛋白标记的骨髓间充质干细胞效率高,标记后对细胞的生长无明显影响.
关键词：骨髓间充质干细胞大鼠标记生长曲线
分类号：R343.2(基础医学)
资助基金：四川省自然科学基金(2006J13-005-1)四川省教育厅项目(2006A155)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 9234-9237 )
英文信息