骨髓间充质干细胞移植入脑缺血大鼠侧脑室后的迁移及分化:免疫荧光标记
朱文静
刘卓
杨振军
徐运
1.南京大学医学院附属鼓楼医院神经内科,江苏省南京市,2100092.南京大学医学院附属鼓楼医院神经内科,江苏省南京市,2100093.南京大学医学院附属鼓楼医院神经内科,江苏省南京市,2100094.南京大学医学院附属鼓楼医院神经内科,江苏省南京市,210009
摘要:目的:骨髓间充质干细胞可以分化成神经细胞替代受损组织,并可分泌生长因子和营养因子来促进其体内细胞的存活和分化.实验将体外扩增和Hoechst33342标记的骨髓间充质干细胞移植入缺血性大鼠侧脑室内,观察干细胞在大鼠脑内的生存、迁移、分化情况及对神经功能恢复的影响.方法:实验于2004-12/2007-06在南京大学医学院附属鼓楼医院科研部完成.①取体质量120~160 g的SD大鼠用于制备移植细胞;另取80只体质量250~300 g的SD大鼠用于制作大脑中动脉闭塞模型.实验方法符合动物伦理学要求.②应用直接贴壁法分离纯化及扩增大鼠骨髓间充质干细胞,荧光染料Hoechst33342标记.③将造模成功的75只大脑中动脉闭塞大鼠按随机数字表法分为3组:模型对照组15只;磷酸缓冲液组30只;骨髓间充质干细胞移植组30只,将骨髓间充质干细胞立体定向移植到大鼠缺血侧脑室中.④术后1,3,6,12,24 d测定大鼠神经功能损害评分,荧光显微镜下观察Hoechst33342标记的骨髓间充质干细胞在脑内的生存和迁移情况,采用免疫荧光法检测胶质原纤维酸性蛋白和微管相关蛋白2的表达.结果:①细胞移植后6 d,12 d骨髓间充质干细胞移植组大鼠的神经功能评分均显著低于磷酸缓冲液组(P<0.05).②移植的骨髓间充质干细胞可在大鼠脑组织中存活,并向缺血区域迁移.③移植第24天Hoechst33342/微管相关蛋白2、Hoechst33342/胶质原纤维酸性蛋白双阳性细胞占Hoechst33342阳性细胞的百分率为(10.45±1.35)%,(8.73±1.38)%.结论:骨髓间充质干细胞可以在动脉闭塞局灶性脑缺血模型大鼠脑中存活,并向缺血区域附近迁移,在一定条件下可分化为神经元和星形胶质细胞,同时能促进局灶性脑缺血大鼠的神经功能恢复.
关键词:干细胞骨髓细胞细胞移植脑缺血
分类号:R394.2(医学遗传学)
资助基金:南京市医学科技重点项目(ZKX0412)
论文发表日期:2007-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 9281-9284 )
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中国组织工程研究与临床康复

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北大核心CSTPCD
ISSN:1673-8225
年,卷(期):2007,11(46)
所属栏目:研究与报告