海藻酸钠载体中成年兔关节软骨细胞生长情况
李鹏翠
卫小春
丁娟
1.山西医科大学第二医院骨科,山西省太原市,0300012.山西医科大学第二医院骨科,山西省太原市,0300013.山西医科大学第二医院骨科,山西省太原市,030001
摘要：目的:软骨细胞单层培养条件下增殖较快,但极易失分化,在生物载体材料构成的立体环境中培养,则能较好的维持表型.实验以海藻酸钠为载体,观察兔关节软骨细表型及增殖情况.方法:实验于2005-09/2006-12在山西医科大学第二医院骨科实验空完成.①实验动物和材料:6月龄新西兰大白免24只,雌雄各半.实验过程中对动物处置符合动物伦理学要求.海藻酸钠由青岛明月海藻公司提供.②实验方法:以培养液配制的0.4%Pronease酶、0.025%Ⅱ型胶原酶顺序消化免软骨分离细胞,以4×109 L-1海藻酸钠的浓度制成细胞悬液.③实验评估:倒置显微镜观察细胞在海藻酸钠中的形态及增殖情况,检测细胞收获效率和存活率.苏木精-伊红染色和AB-PAS染色观察软骨细胞的生长情况及评价软骨分泌胶原的情况.免疫组织化学定性观察Ⅱ型胶原的含量变化及有无Ⅰ型胶原的产生.Alcian blue染色法测定细胞盘中蛋白多糖的含量变化.结果:①软骨经两步酶消化软骨基质逐步解离和降解,细胞被完全分离,消化分离的软骨细胞总数达到5×106,细胞成活率达95.5%.②软骨细胞与海藻酸钠复合后体外培养,细胞生长旺盛、增殖活跃,增殖成株状或岛状,株状细胞团周围有类似的软骨陷窝形成,细胞排列密集,核圆形.③Ⅱ型胶原免疫组化和AB-PAS染色均呈阳性,细胞盘中蛋白多糖含量随培养时间延长逐渐增加.结论:海藻酸钠凝胶能与软骨细胞完全嵌合,是一种良好的软骨组织工程材料.
关键词：关节软骨软骨细胞海藻酸钠组织工程
分类号：R318.08(医用一般科学)
论文发表日期：2007-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 9659-9662 )
英文信息