纳米级阳离子聚合物优化转染siRNA的研究
胡海燕
张梅霞
官习鹏
姜铧
马文丽
1.南方医科大学基因研究所,广东省广州市,5101512.南方医科大学基因研究所,广东省广州市,5101513.南方医科大学基因研究所,广东省广州市,5101514.南方医科大学基因研究所,广东省广州市,5101515.南方医科大学基因研究所,广东省广州市,510151
摘要:背景:转染是基因研究最关键的始动环节,高效安全的基因转染试剂是基因研究的热点问题.纳米级材料表面活性强,易于表面修饰,膜通透性高,如何将物质纳米化应用于基因转染尚在探索之中.目的:观察不同分子质量、结脂度的纳米级阳离子聚合物的转染效率,筛选低毒、高效的优化转染试剂.设计:对照实验.单位:南方医科大学基因研究所.方法:实验于2006-03/2007-06在南方医科大学基因工程研究所实验室完成.以脂质体为阳性对照,将9种不同分子质量、结脂度的纳米级阳离子聚合物聚乳酸聚乙醇酸、壳聚糖-聚己内酯、聚乙烯亚胺-聚乙二醇,包裹FITC标记的以bcl-2基因为靶标的siRNA(0.2 nmol/L),转入无血清培养的白血病细胞株K562,于转染后6 h后补加20%胎牛血清培养基.MTT法测定24,48,72 h后细胞增殖状况,荧光显微镜检测转染48 h后各纳米材料转染效率,流式细胞仪检测白血病细胞株K562细胞Bcl-2蛋白的表达和凋亡率.结果:①荧光显微镜结果:不同材料的纳米级颗粒,其转染效率有统计学差异(P < 0.05),同种材料的纳米结构因其结脂度不同,其转染效率也有统计学差异(P < 0.05).②MTT结果:表明细胞增殖率与转染率正相关.③流式细胞仪结果表明:转染siRNA引起的靶基因表达抑制以及细胞凋亡率与转染效率正相关.结论:分子质量为1 800/2 000,脂结合力为29%的纳米级聚乙烯亚胺-聚乙二醇颗粒,为低毒、高效的转染试剂.
关键词:Bcl-2siRNA纳米生物材料
分类号:R318.08(医用一般科学)
资助基金:广东省卫生厅科研项目(WSTJJ20061116510106197611042927)
论文发表日期:2008-01-01
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:4( 1145-1148 )
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