人肺上皮细胞感染呼吸道合胞病毒后核内活性因子κB与诱导型一氧化氮合酶的表达
刘伟
云云
黄升海
1.安徽医科大学微生物教研室,安徽省合肥市,2300322.安徽医科大学微生物教研室,安徽省合肥市,2300323.安徽医科大学微生物教研室,安徽省合肥市,230032
摘要：目的:呼吸道合胞病毒感染呼吸道上皮细胞后,诱导细胞过度表达活性递质.实验拟观察呼吸道合胞病毒感染人肺上皮细胞A549后核内活件核因子κB,诱导型一氧化氮合酶mRNA和蛋白、一氧化氮和丙二醛表达的变化.方法:实验于2006-12/2007-05在安徽医科大学基础医学院病原与免疫学实验中心完成.①实验过程:将冻存的病毒株复苏后经Hep-2细胞增殖.用呼吸道合胞病毒感染体外培养的A549细胞,分别于感染4,8,16,24h后收集细胞和细胞培养上清.以未感染病毒的细胞为正常对照组.②实验评估:反转录聚合酶链反应检测诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的变化:免疫印迹法(Western-Blot)分别检测核内活性核因子κB、诱导型一氧化氮合酶蛋白的变化:用硝酸还原酶法、硫代巴比妥酸法分别检测细胞培养上清一氧化氮和丙二醛的表达.结果:①A549细胞中核内活性核因子κB有基础表达,经由呼吸道合胞病毒感染后,核内活性核因子κB表达升高.且随着感染时间的延长而增加.②呼吸道合胞病毒感染A549细胞后,诱导型一氧化氮合酶mRNA和蛋白的表达均升高且有时间依赖性,24 h的诱导犁一氧化氮合酶mRNA表达量是基础表达量的近12倍,诱导型一氧化氮合酶蛋白的表达亦显著高于正常对照组.核内活性核因子κB与诱导型一氧化氮合酶的mRNA和蛋白升高表达呈正相关.③呼吸道合胞病毒感染能促进A549细胞培养上清中一氧化氮和丙二醛的表达升高,24 h内细胞上清中的一氧化氮呈缓慢升高变化.结论:在呼吸道合胞病毒感染A549细胞的炎性反应中核内活性核因子κB升高,与诱导型一氧化氮合酶基因和蛋白的上升表达呈正相关.
关键词：核因子κB呼吸道合胞病毒诱导型一氧化氮合酶一氧化氮组织构建
分类号：R329(人体形态学)
资助基金：安徽省教育厅自然科学基金(2006Kj322B)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 2834-2837 )
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