破骨细胞三维培养体系的建立
肖新华1
廖二元2
董源媛1
赵向1
刘江华1
曹仁贤1
文格波1
1.南华大学附属第一医院内分泌科,湖南省衡阳市,4210012.中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所,湖南省长沙市,410013
摘要：背景:建立基质细胞与骨髓细胞共培养模型能诱导破骨样细胞产生,但这种培养体系存在细胞不单纯,不适合基因转染等缺点.目的:建立基质细胞MBA-1细胞与破骨前体细胞RAW264.7共培养形成不混杂基质细胞的成熟多核破骨细胞的新方法.设计、时间及地点:开放性实验,于2006-10/2007-03在南华大学附属第一医院临床研究所实验室完成.材料:小鼠源性破骨前体细胞RAW264.7细胞从ATCC引进,基质细胞MBA-1细胞由周厚德博士惠赠.方法:RAW264.7细胞以1×104/孔接种于Transwell三维培养板下层,将聚碳酸酯膜孔径0.4μm的培养板上层先取出接种MBA-1细胞,待细胞贴壁胞体伸展后,将其重新与下层联合共培养,共培养体系细胞每3d换液1次.主要观察指标:①抗酒石酸酸性磷酸酶染色法观察染色阳性的破骨细胞形态特点.②扫描电镜观察骨吸收陷窝形态,评价共培养形成的破骨样细胞骨吸收活性.结果:共培养体系中的RAW264.7细胞,第9天可见较多TRAP阳性单核细胞,出现TRAP阳性多核破骨样细胞.共培养14d后,已分化成熟的破骨细胞,能形成骨吸收陷窝.结论:MBA-1细胞与破骨前体细胞RAW264.7分层共培养可形成成熟的、有骨吸收功能的多核破骨细胞,且这种破骨细胞中不混杂基质细胞.
关键词：破骨细胞共培养基质细胞组织构建
分类号：R329.471(人体形态学)
资助基金：湖南省自然科学基金(07JJ6160)湖南省卫生厅项目(2007117)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 3863-3866 )
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