载肝细胞生长因子聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子制备、表征及其对培养大鼠肝细胞活力的影响
李志峰1
陈钟1
常仁安1
何友梅2
1.南通大学附属医院肝胆外科,江苏省南通市,2260012.上海交通大学微纳科学技术研究院,上海市,200030
摘要：背景:肝细胞生长因子半衰期短,且不具有靶向性.成熟肝细胞体外大量培养及活力维持难度较大,严重制约肝细胞移植及生物人工肝的临床应用.目的:制备并表征载肝细胞生长因子的聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子,探讨其体外降解、释药行为及对培养大鼠肝细胞活力的影响.设计、时间及地点:对比观察实验,于2006-07/2008-01在南通大学肝胆外科研究所及南通大学江苏省神经再生重点实验室设计完成.材料:SD大鼠10只,肝细胞生长因子由英国Pepro Tech公司提供,聚乳酸由美国Sigma公司提供,O-羧甲基壳聚糖由上海伟康生物技术有限公司提供.方法:以聚乳酸和O-羧甲基壳聚糖为基质材料,采用超声波法制备聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子,用低温磁力搅拌法制备载肝细胞生长因子的聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子.用该载药纳米粒子进行原代人鼠肝细胞培养,并以/不加肝细胞生长因子的普通培养作为对照,采用CCK-8体外细胞增殖检测试还剂盒检测培养肝细胞活力.主要观察指标:观察该载药纳米粒子的结构、粒径及表面形貌,测定其粒径分砸和表面电位,动态监测降解过程中粒子表面形貌的变化、降解过程中质量的损失情况和降解介质的pH值变化情况.并进一步检测培养1周内肝细胞的活力.结果:载肝细胞生长因子的PLA-O-CMC纳米粒子呈球形,其平均粒径为140 nm,粒径分布指数为0.108,载药率为0.126 65%,包封率为76.32%,粒子表面电位为32.8 eV.该载药纳米粒子前24 h释药动力学方程为Q=148.426 6+189.049 3 t1/2(R=O.975 89),符合Huguchi方程:前30 d内释放动力学方程Q=1 086.289 66+58.239 38t(R=0.997 16),符合零级释放方程.载药纳米粒子组肝细胞活力明显高于普通培养组(P＜0.05).结论:实验成功制备并表征了载肝细胞生长因子的聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖纳米粒子,并证实其能够有效维持培养大鼠肝细胞的活力.
关键词：聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖肝细胞生长因子纳米粒子载药生物材料
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：国家自然科学基金(30772130)江苏省"六大人才高峰"高层次人才项目(07-B-018;RC2007086)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 6251-6256 )
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