β受体激动增加人脐静脉内皮细胞内皮型一氧化氮合酶活性的细胞内机制
蒲娟娟1
徐标2
1.郑州大学第一附属医院老年病科,河南省郑州市,4500522.南京鼓楼医院心内科,江苏省南京市,210008
摘要：背景:β-肾上腺素能受体激动可增加内皮型一氧化氮合酶活性的细胞信号转导通路,对于揭示β-肾上腺素能系统调控血管张力的生理学机制有重要价值,既往实验显示异丙肾上:腺素激活内皮型一氧化氦合酶与内皮型一氧化氮合酶蛋白磷酸化有关.目的:探讨β-肾上腺素能受体激动增加人脐静脉内皮细胞内皮型一氧化氮合酶活性信号转导通路中可能涉及的蛋白激酶.设计:对比观察.单位:郑州大学第一附属医院老年病科.材料:实验于2006-09/2007-06在河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室完成.实验材料为郑州大学第一附属医院妇产科住院的健康顺产或剖宫产患者自愿捐献的新生儿无血肿、夹痕的脐带.所有患者对实验均知情同意.实验方案经医院伦理委员会批准.主要试剂:β-肾上腺素能受体激动剂异丙肾上腺素、磷脂酰肌醇3激酶抑制剂(Wortrnannin)、蛋白激酶A抑制剂(H-89)、3H.L-arginine(美国SIGMA公司).方法:设置空白对照组、H-89组、Wortmannin组及H-89+Wortmannin组,每组因素下再分异丙肾上腺素及空白对照两个干预因素组,每小组三复管.观察H-89和Womnannin分别与人脐静脉内皮细胞孵育 10 min,再与异丙肾上腺素孵育30 min后内皮型一氧化氮合酶活性变化.同位素二步色谱法测定3H-L-citrulline的产量反映内皮型一氧化氮合酶活性,人脐静脉内皮细胞上3H-L-citrulline的产量相对空白对照组以百分比形式表达.主要观察指标:各组内皮型一氧化氮合酶活性变化.结果:①内皮型一氧化氮合酶基础活性为每微克蛋白(3 085.62±272.72)mBq,与空白对照组比较,异丙肾上腺素可明显增加内皮型一氧化氮合酶活性(30.72±3.91)%(P<0.001),单纯H-89及Wortmannin不改变内皮型一氧化氮合酶基础活性(0.44±1.00)%,(0.36±1.47)%(P>0.05).②预先加入H-89及Wortmannin后再加入异丙肾上腺素,可见异丙肾上腺素增加内皮型一氧化氮合酶活性的作用受到明显抑制(4.73±2.19)%,(17.35±3.72)%(P<0.001).③联合阻断蛋白激酶A和磷脂酰肌醇3激酶对异丙肾上腺素增加内皮犁一氧化氮合酶活性的抑制作用(4.92±0.99)%,与单纯阻断蛋白激酶A的作用类似,无累加效应(P>0.05).结论:β-肾上腺素能受体激动剂异丙肾上腺素能激活内皮型一氧化氮合酶活性的信号通路,在此过程中蛋白激酶A及磷脂酰肌醇3激酶均有参与.
关键词：人脐静脉内皮细胞β-肾上腺素能受体内皮型一氧化氮合酶蛋白激酶A磷脂酰肌醇3激酶
分类号：R392.2(医学免疫学)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 6589-6592 )
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