人KiSS-1基因克隆及其慢病毒载体的构建
于波
张俐
1.福建中医学院骨伤系,福建省福州市,3501082.福建中医学院骨伤系,福建省福州市,350108
摘要：背景:慢性病毒载体技术是目前转基因中最有效和最成功的方法,技术操作简便.目的:克隆转移抑制基因KiSS-1基因不含信号肽的表达序列,构建人KiSS-1基因的慢病毒表达载体.设计、时间及地点:开放性实验于2006-09/2007-12在福建师范大学发育学院实验室完成.材料:载体pNL-IRES2-EGFP由福建师范大学发育学院实验室保存.方法:从人正常胎盘组织中提取总RNA,经反转录一聚合酶链反应得到KiSS-1基因开放阅读框cDNA序列,并将其克隆到慢病毒载体pNL-IRES2-EGFP中,构建其表达质粒pNL-IRES2-EGFP-KiSS-1.主要观察指标:KISS-1目的基因片段的克隆,重组表达质粒pNL-IRES2-EGFP-KiSS-1的酶切鉴定及测序.结果:经酶切鉴定和基因序列测定,证实重组入载体pNL-IRES2-EGFP的片段为目的基因开放阅读框的核苷酸序列.结论:成功构建了重组质粒pNL-IRES2-EGFP-KiSS-1.
关键词：基因克隆分子病毒载体
分类号：R394(医学遗传学)
资助基金："KiSS-1 和p27kipl基因转染治疗骨肉瘤的基础与临床研究"(WKJ 2005-2-014)福建省高等学校新世纪优秀人才支持计划(闵教科(2006)35号)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 8230-8234 )
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