损伤胰腺提取液对骨髓间充质干细胞分化为胰岛样细胞的作用
王启伟
叶玲玲
刘红
刘兴茂
李世崇
吴本传
陈昭烈
1.解放军军事医学科学院生物工程研究所细胞工程室,北京市,1000712.解放军军事医学科学院生物工程研究所细胞工程室,北京市,1000713.解放军军事医学科学院生物工程研究所细胞工程室,北京市,1000714.解放军军事医学科学院生物工程研究所细胞工程室,北京市,1000715.解放军军事医学科学院生物工程研究所细胞工程室,北京市,1000716.解放军军事医学科学院生物工程研究所细胞工程室,北京市,1000717.解放军军事医学科学院生物工程研究所细胞工程室,北京市,100071
摘要：背景:损伤胰腺提取液含有胰腺再生过程的特异性生长因子,能够促进β细胞系增殖和胰岛素分泌,可能有助于胰岛再生和细胞分化.目的:规察损伤胰腺提取液对骨髓间充质干细胞分化为胰岛样细胞的影响.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2005-06/2007-03在解放军军事医学科学院牛物工程研究所完成.材料:清洁级雄性Sprague-Dawley大鼠6只,由解放军军事医学科学院实验动物中心提供.活化素A、视黄酸、胰蛋白酶抑制剂为Sigma公司产品,链脲菌素为Sigma公司产品.方法:大鼠腹腔注射链脲菌素,2d后血糖浓度超过10 mmol/L时取其胰腺组织,在含有胰蛋白抑制剂的磷酸盐缓冲液中制备匀浆,2次离心后取上清,即为损伤胰腺提取液.采用密度梯度离心法分离人鼠骨髓间充质干细胞,当传代细胞生长至70%～80%融合时,随机分为4组:埘照组以体积分数为0.02的胎牛血清的低糖DMEM培养11 d:活化索A+视黄酸组以活化素A、视黄酸各自诱导24 h,再以碱性成纤维牛长因子、尼克酰胺、尼克酰胺+exendin 4各自诱导3 d:活化素A+视黄酸+损伤胰腺提取液组在前组基础上添加损伤胰腺提取液;损伤胰腺提取液组单纯以损伤胰腺提取液诱导11 d.主要观察指标:应用免疫细胞化学和反转录聚合酶链反应等方法对分化细胞表型进行检测,ELISA法检测细胞胰岛素的分泌水平.结果:活化素A+视黄酸组、活化素A+视黄酸+损伤胰腺提取液组有较多的胰岛素阳性反应细胞出现,且后者形成的胰岛样结构较前者大而多:损伤胰腺提取液组可见较少的胰岛素阳性反应细胞及胰岛样结构.各诱导组均检测胰岛素1 mRNA的表达,培养上清中均可检测到胰岛素的分泌,且活化素A+视黄酸+损伤胰腺提取液组胰岛素分泌水平＞活化素A+视黄酸组＞损伤胰腺提取液组(P＜0.05).对照组子项指标均呈阴性表达.结论:摹丁前期活化素A、视黄酸及其他成熟因子的诱导方案基础上,损伤胰腺提取液对骨髓间充质干细胞分化为胰岛样细胞具有促进作用,能够提高诱导分化效率.
关键词：骨髓间充质干细胞损伤胰腺提取液胰岛样细胞
分类号：R394.2(医学遗传学)
资助基金：军队十一五计划项目(06Q086)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：5( 8458-8462 )
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