载基因壳聚糖纳米粒的免疫增强效应
王怡婷
沃恩康
1.浙江省医学科学院生物工程研究所,浙江省杭州市,3100132.浙江省医学科学院生物工程研究所,浙江省杭州市,310013
摘要：背景:壳聚糖是一种天然的多糖,具有生物降解性、生物相容性及安全无毒等特点,因而成为基因治疗载体研究的热点.目的:将壳聚糖包载含戊型肝炎主要抗原表位基因片段的重组质粒pcHEV23,制备成壳聚糖-pcHEV23纳米粒.并观察其在小鼠体内的免疫增强效果.设计、时间及地点:对比观察实验,于2007-0612008-08存浙江省医学科学院生物工程研究所完成.材料:将等浓度pcHEV23分别与质量浓度为1.4,0.7,0.4,0 g/L的壳聚糖按1:1体积比混合,复凝聚法制备壳聚糖(高)-pcHEV23、壳聚精(中)-pcHEV23、壳聚糖(低)-pcHEV23、空白壳聚糖等4种纳米颗粒.方法:以空质粒pcDNA3、空白壳聚糖纳米粒、质粒pcHEV23为对照组,壳聚糖(高)-pcHEV23、壳聚糖(中)-pcHEV23、壳聚糖(低)-pcHEV23为实验组,进行免疫小鼠,共免疫3次,每次间隔3周,免疫后2周断尾取血,并于末次断尾采血后进行眼球摘除取血.主要观察指标:检测制备的纳米粒平均粒径、包封率、抵抗核酸酶降解能力;ELISA方法检测免疫小鼠后血清中HEV IgG抗体产生情况;流式细胞仪检测外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞百分比和CD4+/CD8+比值.结果:制备的纳米粒粒径170-470 nm,对质粒pcHEV23的包封率均95%,能有效抵抗核酸酶降解,起到保护pcHEV23的作用.免疫实验表明壳聚糖-pcHEV23纳米粒可上调小鼠血清HEV IgG抗体水平,并显著提高小鼠外周血CD4+T淋巴细胞百分比及CD4+/CD8+比值.结论:壳聚糖能高效装载外源基因pcHEV23,保护其免受核酸酶的降解,有效提高小鼠细胞免疫水平,显示出具有良好的免疫增强作用,作为基因载体具有较大的应用潜力.
关键词：壳聚糖基因载体细胞免疫
分类号：R318(医用一般科学)
资助基金：浙江省医药卫生科学研究基金(2007A001)浙江省自然科学基金(2006QN003;Y206384)
论文发表日期：2008-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 8835-8838 )
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